磷酸化蛋白提取试剂盒现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应磷酸化蛋白提取试剂盒现货，我公司销售高质量、高纯度的生化试剂，同时价格极具竞争力，满心期待您的咨询订购。

名称：磷酸化蛋白提取试剂盒现货
编号：QN1067
品牌：百奥莱博
规格：50T|100T
磷酸化蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀，放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4℃12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
(1)裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml;
(2)贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液;
(3)在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，
(4)将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20～30min;
(5)悬浮细胞：4℃400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，
涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次;
(6)裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃12000g离心30min;
(7)将上清移入新的EP管中;
(8)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

注意事项：
(1)实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境;
(2)PSMF(有毒)现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。

储存条件：-20℃

我公司的磷酸化蛋白提取试剂盒现货，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·牛磺酸
编号：QN0638
英文名称：Taurine
规格：5g
牛黄酸虽不是构成蛋白质的氨基酸，但分布很广，是动物体生长发育所必须的氨基酸，本品仅可用在科学研究领域。

别名：氨基乙磺酸
CAS号：107-35-7
分子式：C2H7NSO3
分子量：125.15
性状：白色棒状结晶
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml
储存条件：2～8℃

·细胞核提取试剂盒
编号：QN1309
英文名称：Nuclear Extraction Kit
规格：50T|100T
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，性能稳定。

操作步骤：
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer，再加入50μL Reagent A，0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织，可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5 ×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，再加入50μL Reagent A，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5mL离心管中，4℃，700g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀。
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重悬液，沿管壁小心地加入到此离心管中，置于Medium Buffer之上，4℃，700 g 离心5min。细胞核沉淀在管底。
4. 弃上清，在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉淀，1000g 离心10min ，弃上清，得到较纯的细胞核沉淀。
5. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。

注意事项：
1. 为保证获得完整的细胞核，务必做到：第一，全程低温操作;第二，快速;第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞，这是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。转速与离心力换算：G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G为离心力，一般以ｇ(重力加速度)的倍数来表示;[rpm]2即：转速的平方;R为半径，单位为厘米。

储存条件：4℃


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·JC-1线粒体膜电位荧光探针
编号：QN1290
规格：1mg|5mg
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψ m 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1 聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时，JC-1 不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1 为单体，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC- 1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-1 单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为529nm;JC-1 聚合物的最大激发波长为585nm，最大

JC-1用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为1～20µg/mL，对于很多细胞适宜采用的JC-1浓度为10µg/mL 。

别名：JC-1荧光探针
CAS号：3520-43-2
分子式：C25H27Cl4IN4
分子量：652.23
纯度：≥95%(HPLC)
储存条件：-20℃干燥避光


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·卡托普利
编号：QN0754
英文名称：Captopril
规格：5g
CAS号：62571-86-2
分子式：C9H15NO3S
分子量：217.28
纯度：＞99%
性状：白色或类白色结晶粉末，易溶于水，乙醇。
储存条件：18～25℃

·G418遗传霉素硫酸盐
编号：QN0062
英文名称：Geneticin；G-418 Sulfate
规格：100mg
本品是真核表达筛选用抗生素，可以用于筛选表达特定抗性基因的稳定细胞株。筛选哺乳动物细胞，推荐起始筛选浓度为400微克/毫升;筛选植物细胞，推荐起始筛选浓度为10微克/毫升;筛选酵母，推荐起始浓度为500微克/毫升。根据起始浓度的效果可以再适当升高或降低G-418的使用浓度。

CAS：108321-42-2
分子式：C20H40N4O10·2H2SO4
分子量：692.71
储存条件：2～8℃
性状：白色粉末。
溶解性：可溶于水、甲醇、缓冲液和培养基。溶解后，0.22μm过滤除菌，分成小包装，4℃可保存12个月，-20℃保存时间更长。最常用的储存液使用100mMHEPES(pH7.3)配制，浓度为50mg/ml。使用HEPES配制的好处是加入储存液不会改变培养体系的pH值。

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