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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻
- 保质期:
长期
- 英文名:
SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
- 库存:
323
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售4×蛋白上样缓冲液(含DTT)现货价格,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:4×蛋白上样缓冲液(含DTT)现货价格
品牌:百奥莱博
编号:QN1168
产地:国产|进口
英文名:SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
规格:10ml
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
想要了解更多关于4×蛋白上样缓冲液(含DTT)现货价格的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
·40%Acr/Bis(37.5:1)制胶液
编号:QN1165
英文名称:40% Acrylamide/Bis Solution, 37.5:1
规格:100mL|500mL
储存条件:4℃避光,有效期一年
·柠檬酸钠缓冲液(SSC)
编号:QN0125
英文名称:SSC
规格:100mL|500mL
本品柠檬酸钠缓冲液是分子生物学上最为标准的印迹及分子杂交处理液,20*SSC用于杂交实验变性及清洗常用浓缩型缓冲液。
浓度:0.1mol/L
特征:pH4.5,无菌溶液
·RNA抽提试剂(25:24:1)
编号:QN0914
英文名称:RNA Extraction Reagent (Enol:Chloroform:Isoamylol=25:24:1,pH<5.0)
规格:100mL|500mL
酚:氯*(代"仿"):异戊醇试剂是由水饱和酚、氯*(代"仿")和异戊醇按 25:24:1的体积比混合而成的,主要用于RNA的提取等试验。苯酚使蛋白质变性,同时抑制了RNase的降解作用。氯*(代"仿")抽提加速有机相与液相分层,去除核酸溶液中的迹量酚。异戊醇减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。使用酚:氯*(代"仿"):异戊醇抽提离心后的上层为含RNA的水相、中间为变性蛋白与DNA,下层为有机溶剂相。静置后产品有分层现象,使用时将产品摇匀后用移液器吸取即可。
酚:氯*(代"仿"):异戊醇试剂有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。
·邻苯二甲醛
编号:QN0688
英文名称:O-Phthalaldehyde
规格:10g
别名:OPA
CAS号:643-79-8
分子式:C8H6O2
分子量:134.13
性状:黄色针状晶体
熔点:54~56℃
储存条件:2~8℃
·CCK-8试剂盒
编号:QN1293
英文名称:Cell counting KIT-8
规格:100T|500T|500T*10
本试剂盒为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定OD 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
活力计算:.
细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[ A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
储存条件:4℃,有效期一年
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)现货价格关键词:4×蛋白上样缓冲液,SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT),QN1168,4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
BL0234 GST-琼脂糖凝胶4B
PY01-012 酵母浸粉 250|500克
ARB10007 人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D G)elisa检测说明书
PY02-425 假单胞分离琼脂 250克
ARB12590 大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)含量分析 Rat matrix metalloproteinase 5,mmp-5 ELISA KIT
ARB13615 兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)Elisa方法检测 Rabbit intercellular adhesion molecule 2,icam-2 ELISA KIT
L0201 小鼠IgA类单克隆抗体腹水纯化试剂盒
PC4601 THERMOscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒)
F030640 FITC标记兔抗驴IgG抗体 Polyclonal Rabbit Anti-Donkey IgG*FITC
9049-37-0 Polygalacturonic acid sodium salt?多聚半乳糖醛酸
四乙基溴化铵 ONPG 71-91-0
ARB11876 人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)Elisa方法检测 Human cytokinin mb,ckmb ELISA KIT
液体生物防腐剂 Zearalenone
SJ0796 干酪素
PY02-111 B-P增菌液 250克
KT207 2x PCR Reagent
ARB10735 人纤维母细胞表面抗原(FSP)含量测试 Human fibroblast surface protein,fsp ELISA KIT
ARB12034 大鼠γ干扰素(IFN-γ)elisa检测操作说明书 Rat lactate dehydrogenase,ldh ELISA KIT
SJ0486 PHA-P 植物血球凝集素P
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)现货价格关键词:4×蛋白上样缓冲液,SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT),QN1168,4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
·香草醛
编号:QN0763
英文名称:Vanillin
规格:25g
别名: 香兰素
CAS号:121-33-5
分子式:C8H8O3
分子量:152.15
性状:白色针状结晶,有芳香气味。
·盐酸普鲁卡因
编号:QN0811
英文名称:Procaine hydrochloride
规格:25g|100g|500g
CAS号:51-05-8
分子式:C13H21ClN2O2
分子量:272.77
性状:白色结晶或结晶性粉末,无臭,味微苦。
·黄原胶
编号:QN0681
英文名称:Xanthan gum
规格:500g
由于黄原胶的大分子特殊结构和胶体特性,而具有多种功能,可作为乳化剂、稳定剂、凝胶增稠剂、浸润剂、膜成型剂等。
CAS号:11138-66-2
储存条件:RT
黄原胶在大多数以水为基相体系内完全溶解,但由于它有极强的亲水性,如果直接加入水中而搅拌不充分,外层吸水膨胀成胶团,从而阻止水份进入里层,进而影响作用的发挥,因此必须注意正确使用。
·甘油激酶
编号:QN0381
英文名称:Glycerol Kinase
规格:1KU
CAS号:9030-66-4
储存条件:-20℃
性状:白色冻干粉末
来源:微生物
Activity:≥250U/mg protein
酶活定义:在pH7.9,温度为37℃的条件下,1个单位每分钟可催化1μmol的甘油生成3-磷酸甘油。
分子量:55 kDa (SDS-PAGE)
等电点:5.1
米氏常数:3.8x10-5M (Glycerol)
最适pH:8.0
最适温度:80℃
pH稳定性:5.0~10.0 (30℃, 20hr)
温度稳定性:<60℃ (pH7.5, 30min)
抑制剂:Ag+,Hg2+
说明:该酶可溶于20mM 磷酸钾缓冲液(pH 7.5)。
·Bora培养基
编号:QN0674
英文名称:Boric Acid
规格:500g|1kg|5kg
本品常用于试验用缓冲液的配置。
分子式:H3BO3
分子量:61.83
纯度:≥99.5%
性状:白色结晶性粉末或无色微带珍珠状光泽的鳞片
储存条件:室温
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系统的负担,导致包涵体的形成。生长温度可能是影响大肠杆菌高度表达目的蛋白的最重要因素。低温培养能在一定程度上抑制包涵体的形成。IPTG 的浓度对表达水平的影响也非常大。所以通过试验确定最佳的培养条件是很必要的。6. 将所有样本室温最高速度离心 1 分钟,弃上清,沉淀重悬于 100 微升 1×SDS 蛋白上样缓冲液中,100℃ 加热 5 分钟,室温最高速度离心 1 分钟,取 15 微升样品上样于 SDS 聚丙烯酰胺凝胶,用 SDS-PAGE 观察表达产物条带,从而确定优化的培养条件。二、大量表达靶蛋白
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
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