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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cell counting KIT-8
- 库存:
369
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售北京现货CCK-8试剂盒折扣价,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:CCK-8试剂盒
英文名:Cell counting KIT-8
品牌:百奥莱博
编号:QN1293
产地:国产|进口
本试剂盒为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定OD 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
活力计算:.
细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[ A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
储存条件:4℃,有效期一年
关键词:CCK-8试剂盒,Cell counting KIT-8,QN1293
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| 编号 | 名称 |
| QN0448 | 氧化型辅酶Ⅰ |
| QN0455 | 尿素酶 |
| QN0272 | 人血清IgM |
| QN0949 | 2×SYBR Green PCR Mastermix |
| QN0132 | MES(吗啉乙磺酸) |
| QN0066 | 盐酸万古霉素 |
| QN0047 | 渥曼青霉素 |
| QN0264 | 6-氨基正己酸 |
| QN0311 | 植物血球凝集素P |
| QN0302 | L-瓜氨酸 |
| QN1249 | 多聚甲醛 |
| QN1276 | 非变性蛋白预制胶(12%) |
| QN0547 | 肌苷 |
| QN1160 | DAB法显色试剂盒(山羊IgG) |
| QN0922 | 固相RNase清除剂 |
| QN0287 | DiI标记氧化型低密度脂蛋白 |
| QN0526 | 5-氟胞嘧啶 |
| QN0221 | 玉米素 |
| QN0286 | Human HDL I125放射性标记高密度脂蛋白 |
| QN0542 | 尿苷 |
| QN0098 | 红霉素 |
| QN0252 | 十二烷基肌氨酸钠(SLS) |
| QN0945 | 随机引物 |
| QN0838 | 甲氨蝶呤 |
| QN0740 | 鲁米诺 |
| QN0076 | 青霉素G钠盐 |
| QN0493 | 谷胱甘肽还原酶 |
| QN0328 | 胶原蛋白Ⅰ型 |
| QN0794 | POPOP |
| QN1305 | 阿氏液(红细胞保存液) |
| QN1238 | 20×TBS |
| QN0811 | 盐酸普鲁卡因 |
| QN0063 | 氨苄青霉素钠 |
| QN0895 | 细菌基因组DNA提取试剂盒 |
| QN1289 | DCFH-DA活性氧ROS荧光探针 |
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