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北京百奥莱博科技有限公司
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236
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Mycoplasma Detection Kit
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应支原体检测试剂盒北京现货促销,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:支原体检测试剂盒
英文名:Mycoplasma Detection Kit
品牌:百奥莱博
编号:QN1316
产地:国产|进口
规格:100T-200T
本试剂盒是利用荧光染料检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
操作步骤:
贴壁细胞:
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2×104。同时,接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。
2.5天后,先吸去培养液,再加入1ml的固定液,静置20min,
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15-20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入一滴封片液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
悬浮细胞:
1.收集需检测的细胞,1500rpm,5min。
2.将收集的细胞涂片于载玻片上,再加1ml的固定液,静置20min。
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15~20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,用无菌水洗涤玻片3次,直接风干。风干后加入一滴封固液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
结果判断(参考):
阴性:仅见细胞的细胞核呈现黄绿色荧光。
阳性:除细胞外,细胞周围可见大量的大小均一的荧光着色颗粒。
注意事项:
1.Hoechst工作液对人体有害,请注意防护。
2.固定液有刺激性气味,建议在通风橱进行固定。
3.支原体检测时,最好用不含抗生素的培养液培养2~3代,这样容易避免假阴性结果。
4.本试剂盒用于6孔板检测时,可以进行50次检测反应。
5.检测支原体污染,可以使用支原体高效Vero细胞,这样可以提高检测灵敏度,即将被检测样品接种于Vero细胞进行检测。
储存条件:4℃避光,有效期2年
关键词:支原体检测试剂盒,QN1316,Mycoplasma Detection Kit
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常规片断级的选择指南: 所谓常规级,即回收片段大小介于100bp和10kb之间,在这个范畴内包含了一般的质粒或者克隆片段的回收。主流方法是柱回收试剂盒。1. Qiaquick Gel Extraction Kit品牌:Qiagen回收范围:70bp-10kb特点:高达80%回收率操作快速简单,3步完成70bp-10kb片段的回收提供三色指示剂的电泳上样loading Buffer,方便判断和操作回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
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