谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)优惠

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北京百奥莱博专业生产供应谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)优惠，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)优惠
产地：国产|进口
英文名：Glutathione Agarose Resin
规格：10ml
品牌：百奥莱博
Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载＞20mg GST融合蛋白。

此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

基质（Matrix）：4%琼脂糖微球
配体（Ligand）：通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞20mg GST protein/ml 基质（40kDa）
最大压力（PressureMax）：0.1 MPa, 1bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。
结合/洗杂缓冲液：PBS，pH7.4(140mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4)
洗脱缓冲液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 8.0
【注】：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。

使用方法
【注】样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。

1样品纯化
1）装柱：将Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。

2 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。

3 填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。

注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2） Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

关于谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)优惠的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
编号：SY0279
英文名称：One Step Pcr Cloning Kit
规格：25T
一步法（快速/无缝）克隆试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点，可高效克隆50 bp～10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase，Exnase中添加了独特的重组增强因子，显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现高效克隆 (100 cfu/ng Vector)，而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

一步法（快速/无缝）克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。

产品组份：
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定。


图一 实验流程概览

注：插入片段PCR扩增时，引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记)，使得扩增产物5’和3’最末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。


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·动植物组织RNA稳定液
编号：SY0267
英文名称：Tissue Stabilizer
规格：100ml
RNA酶广泛存在环境中，很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA，从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻，或者立即进行RNA的纯化，给研究人员的户外工作带来很多不便。

动植物组织稳定液（Tissue Stabilizer）是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA的完整性，一种无毒溶液，可迅速渗入组织，灭活内源RNase。具有以下特点：

1）操作极其简便：只需要将新鲜组织切成合适大小（≤0.5 cm）的组织块，浸入5~10倍体积的本品中即可。2）稳定周期长：经本品浸渍的组织/细胞可在37℃保存1天，室温保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃长期保存。3）下游兼容性广：几乎兼容于所有的RNA分离方法，如Total RNA Extraction Reagent总RNA抽提试剂，以及商业化的几乎所有RNA抽提试剂盒，包括离心柱抽提法，磁珠纯化法等。4）应用性广：可用于多种动植物组织如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等的保存，还可用于酵母、组织培养细胞等。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）经本品稳定液处理的样本还可做DNA的提取，甚至蛋白质的提取，但由于本品会变性蛋白质，因此不适合做天然蛋白的提取。
3）本本品稳定液室温保存过程中可能会产生一些沉淀，只需要在使用前放到37℃温育片刻，并摇晃使其重溶即可。
4）本本品稳定液仅适用于新鲜组织，不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的稳定性，可使用我司的本品-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液，即可在将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态，并进行RNA抽提的过程中，维持RNA的稳定性。

操作流程

1. 样品处理：
A. 动物组织：本品稳定液不会破坏动物组织结构的完整性，因此，已经浸入本品的组织平衡一段时间后，可从溶液中取出，切成更小的组织块（≤0.5 cm大小），再重新放回本品稳定液中。另外，某些动物组织如骨头具有比较弱的液体渗透性，不适合用本品进行RNA保护。
使用：将组织切成合适的大小块（≤0.5 cm大小）后，加入5倍体积的本品稳定液。
B. 植物组织：植物组织天生具有的屏障如叶子表面的蜡层可阻碍本品稳定液的渗透，往往需要破坏这些屏障层从而允许溶液的浸透。对于许多柔软的植物组织如嫩叶，嫩茎等，本品可直接渗透且达到理想的RNA保护效果。
使用：将组织切成合适的大小块（≤0.5 cm大小）后，加入5倍体积的本品稳定液。
C. 组培细胞、白细胞：按照标准实验操作方法收集细胞（用PBS清洗1-2次）。之后往细胞内加入5～10倍体积的本品稳定液。
D. 酵母：收集大约108个细胞 (12,000 g，2 min)，弃上清。加入0.5～1 ml的本品稳定液。长期保存时应将酵母细胞置于本品稳定液中，4℃放置1小时。然后离心收集细胞 (12,000 g，5 min)，弃上清，再置于-80℃保存。

2. 样品保存：
A. -80℃保存：对于归档的样本建议-80℃保存，且效果最佳，样本可长期保存，-80℃条件下本品溶液也会结冻。
首先需要让样本4℃浸透过夜，然后再转移到-80℃。如果中间需要做样本的融化，建议取出4℃浸透过夜的组织或者离心收集细胞，然后再冻存在-80℃。之后，样本可直接放在室温融化，之后重新冻上，不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
B. -20℃保存：也适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃冻住，但可能会形成结晶。不会对后续RNA分离造成影响，样本可长期保存。
首先需要让样本4℃浸透过夜，然后再转移到-20℃。之后，样本可直接放在室温融化。重新冻上后不会造成RNA量的损失或者RNA完整性的破坏。
C. 4℃保存：大部分样品放到本品溶液中，稳定保存1个月，不会有明显的RNA降解发生。
D. 室温（25℃）保存：建议低温环境保存。若条件不允许，请将本品稳定液于冰上冷却几个小时，然后将样品浸入此溶液中，室温稳定保存1周，不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存：纯化的RNA样本于37℃孵育24h，结构依然完整。

3. RNA提取：
注意：RNase失活的过程是可逆的，在样本使用前不要清洗掉本品稳定液。
A． 组织样本：直接用灭菌镊子从本品稳定液中取出组织块，然后用干净的吸水纸吸掉表面的液体。之后立即置于裂解液中匀浆。
B． 细胞样本：由于本品稳定液密度较大，此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说，保存在本品稳定液中的细胞能承受更高的转速，并维持细胞的完整性。大部分细胞能够承受离心速度 (5,000 g，5 min)，收集细胞沉淀。注意：由于不同细胞承受离心力会有差异，建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。
C．之后进行后续的RNA抽提，兼容各种常见的RNA抽提试剂，以及商业化的RNA抽提试剂盒。


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