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- 百奥莱博
- 北京
- SY0321-ZEW
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃，避免反复冻
- 保质期：
长期
- 英文名：
1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
- 库存：
275
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)厂商在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)厂商，产品信息：
类别：蛋白质研究
英文名：1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂) | SY0321 | 100ml |
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（1×），裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
(一) 培养细胞样品：
1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。
北京1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)厂商专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
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1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)由我公司长期专业供应，公司为广大顾客提供 1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)产品说明，生产厂家，价格，规格，哪里买 。公司遵循高品质的产品，高质量的技术服务，合理的价格，是国内研发与生产，销售合为一体的一家大型企业，我们承诺：以最少的经费，最高的效率，得到您最需要的实验结果，同时我们承诺，若有质量问题，无条件退换。
更多有关北京1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)厂商的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：
| 编号 | 类别 | 名称 |
| SY0280 | 克隆与表达 | 多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 |
| SY0105 | 报告基因检测 | ERSE-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0032 | 核酸扩增(PCR) | 2×Long PCR Master Mix(不含染料) |
| SY0613 | 其他细胞生物学试剂 | 重组人IFN-β1b |
| SY0668 | 二抗 | DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| SY0144 | 报告基因检测 | GLI3-Luc报告基因质粒 |
| SY0070 | 报告基因检测 | NFAT-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0263 | 核酸电泳和回收 | 50×TAE缓冲液 |
| SY0205 | 报告基因检测 | AP3-GFP报告基因质粒 |
| SY0096 | 报告基因检测 | Oct4-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0572 | 探针标记及检测 | 线粒体红色荧光探针(CMXRos) |
| SY0438 | 蛋白质研究 | 人源乙酰化低密度脂蛋白 |
| SY0685 | 二抗 | Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| SY0180 | 报告基因检测 | ER-GFP报告基因质粒 |
| SY0238 | 报告基因检测 | 腔肠素cp |
| SY0294 | 核酸扩增(PCR) | 耐热逆转录酶II |
| SY0199 | 报告基因检测 | ERSE-GFP报告基因质粒 |
| SY0605 | 其他细胞生物学试剂 | 聚凝胺 |
| SY0580 | 探针标记及检测 | DPH(二肉桂酰) |
| SY0191 | 报告基因检测 | Pax6-GFP报告基因质粒 |
| SY0590 | 探针标记及检测 | 内质网绿色荧光探针(活细胞) |
| SY0405 | 蛋白质研究 | 3ml重力层析空柱 |
| SY0114 | 报告基因检测 | pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照 |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购北京1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)厂商。
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文献和实验-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意：在准备做磷酸（酯）酶实验的时候，不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe： 1.称取 790 mg 的 Tris-Base，加到 75 ml 去离子水中，加入 900 mg 的 NaCl，搅拌
样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解液
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