p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA

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名称：p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA
英文名：p53 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的p53 consensusoligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－p53的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

p53 consensus oligo的序列如下：
5"-TAC AGA ACA TGT CTA AGC ATG CTG GGG ACT-3"
3"-ATG TCT TGT ACA GAT TCG TAC GAC CCC TGA-5"

EMSA突变探针－p53中p53的公认的结合位点发生了突变，从而使p53无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和p53的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和p53的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA关键词：p53凝胶迁移突变探针(1.75μM),YT241,p53 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)

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·FoxO4抗体
编号：YT777
英文名称：anti-FoxO4 antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成人FoxO4一段多肽经过适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本FoxO4抗体识别的是总FoxO4(total FoxO4)，可以检测内源性的FoxO4蛋白水平。它对磷酸化的FoxO4也敏感，但检测未磷酸化的FoxO4效果更好。

转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和FoxO3a，和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似，介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后，可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用，而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化，导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中，从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。

FoxO4和FoxO1和FoxO3a相似，都和急性白血病有关，都可以被Akt磷酸化修饰而从细胞核转运到细胞浆中而丧失基因转录活性。FoxO4有三个磷酸化位点，Thr32,Ser197和Ser262。Akt介导的磷酸化和Sirt1等介导的去乙酰化对FoxO4起重要调控作用。FoxO4可结合并抑制myocardin，从而抑制平滑肌细胞分化。FoxO4还可以下调低氧反应中的关键蛋白HIF-1α的蛋白水平。

产品组份：
FoxO4抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：人FoxO3a Glu50附近一段多肽
宿主：兔
用途：WB
交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
FoxO4分子量：～65kD
推荐稀释比例：WB(1:1000)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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