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北京百奥莱博专业生产销售p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA
英文名:p53 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的p53 consensusoligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-p53的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
p53 consensus oligo的序列如下:
5"-TAC AGA ACA TGT CTA AGC ATG CTG GGG ACT-3"
3"-ATG TCT TGT ACA GAT TCG TAC GAC CCC TGA-5"
EMSA突变探针-p53中p53的公认的结合位点发生了突变,从而使p53无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和p53的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和p53的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA关键词:p53凝胶迁移突变探针(1.75μM),YT241,p53 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
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p53凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA关键词:p53凝胶迁移突变探针(1.75μM),YT241,p53 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
·FoxO4抗体
编号:YT777
英文名称:anti-FoxO4 antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成人FoxO4一段多肽经过适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本FoxO4抗体识别的是总FoxO4(total FoxO4),可以检测内源性的FoxO4蛋白水平。它对磷酸化的FoxO4也敏感,但检测未磷酸化的FoxO4效果更好。
转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和FoxO3a,和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用,而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化,导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中,从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
FoxO4和FoxO1和FoxO3a相似,都和急性白血病有关,都可以被Akt磷酸化修饰而从细胞核转运到细胞浆中而丧失基因转录活性。FoxO4有三个磷酸化位点,Thr32,Ser197和Ser262。Akt介导的磷酸化和Sirt1等介导的去乙酰化对FoxO4起重要调控作用。FoxO4可结合并抑制myocardin,从而抑制平滑肌细胞分化。FoxO4还可以下调低氧反应中的关键蛋白HIF-1α的蛋白水平。
产品组份:
FoxO4抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人FoxO3a Glu50附近一段多肽
宿主:兔
用途:WB
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
FoxO4分子量:~65kD
推荐稀释比例:WB(1:1000)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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