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YT272型萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)现货供应

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  • ¥190 - 1980
  • 百奥莱博
  • 北京
  • YT272-ELP
  • 2025年07月16日
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      一年

    • 英文名

      Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit

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      585

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应YT272型萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)现货供应,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:YT272型萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)现货供应
    编号:YT272
    规格:100次|1000次
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    本试剂盒是一种以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶,简称renilla luciferase活性的试剂盒。

    海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的过程中,会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。

    产品细节图片1
    海肾萤光素酶的检测原理图。

    通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参,以消除由于质粒的转染效率不同而带来的误差;另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。海肾萤光素酶催化Coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。

    注意事项:
    1. 为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入海肾萤光素酶检测工作液。
    2. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
    3. 样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
    4. 海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况,此时用无水乙醇把体积补足至100μl,并混匀后即可使用。
    5. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降,因此不可配制成工作液后长期保存。
    6. 为避免由于质粒转染细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入适当的萤火虫萤光素酶的报告基因质粒作为内参,采用百奥莱博的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT272)进行检测;也可以同时转入β-半乳糖苷酶报告基因质粒作为内参,然后采用百奥莱博的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)的检测。

    储存条件:-20℃,有效期一年。

    YT272型萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)现货供应外,我公司正在打折促销以下产品:
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    ·Western二抗稀释液
    编号:YT070
    英文名称:Western Secondary Antibody Dilution Buffer
    规格:100ml
    本品可以用于Western时二抗的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。按照每个二抗稀释10毫升计算,一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。

    注意事项:本Western二抗稀释液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

    储存条件:4℃,有效期一年。

    ·CREB凝胶迁移探针(1.75μM)
    编号:YT218
    英文名称:CREB Probe For EMSA(1.75μM)
    规格:60μl
    本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的CREB consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的CREB结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争,可以进行30-60个冷竞争反应。

    CREB consensus oligo的序列如下:
    5"-AGA GAT TGC CTG ACG TCA GAG AGC TAG-3"
    3"-TCT CTA ACG GAC TGC AGT CTC TCG ATC-5"

    本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。

    注意事项:
    1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
    2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

    储存条件:-20℃,有效期一年。


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    ·天冬氨酸激酶
    编号:YT573
    英文名称:Aspartate Kinase (Crude Enzyme)
    规格:100ml|1L
    本酶为大肠杆菌表达的天冬氨酸激酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化天冬氨酸的磷酸化。

    CAS:9012-50-4
    外观:半透明黄色溶液
    酶促反应:ATP + L-aspartate = ADP + 4-phospho-L-aspartate
    储存条件:-20℃,有效期1个月。

    注意事项:
    1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
    2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
    3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
    4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。

    ·cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-)
    编号:YT395
    英文名称:First Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H minus)
    规格:10次
    本品是一种采用了经过改造和优化的M-MuLV反转录酶(RNase H-),用于在总RNA、mRNA等RNA模板的基础上反转录产生cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。

    采用本试剂盒可以合成长达13kb的cDNA第一链。在采用M-MuLV反转录酶(RNase H-)的情况下,由于缺失了RNase H,RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解,这样反转录出来的cDNA的长度就会更长,并且产量更高。

    试剂盒中提供了RNase Inhibitor,确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。

    试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物,前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录,后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。

    试剂盒中提供的Control Primer为17聚,即引物的长度为17个碱基。试剂盒中提供的Control RNA为带有3’poly(A)的1.1kb RNA。

    使用本试剂盒合成的第一链,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。

    本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行10个cDNA第一链样品的合成。

    产品组份:
    M-MuLV反转录酶(RNase H-)(200U/μl)————2000U
    Reaction Buffer(5X)———————————50μl
    RNase Inhibitor(20U/μl)————————10μl
    dNTP Mix(10 mM each)——————————20μl
    Oligo(dT)18 Primer(0.5μg/μl)—————10μl
    Random Hexamer Primer(0.2μgμl)————10μl
    Control RNA(20ng/>μl)—————————6μl
    Control Primer(5pmol/μl)————————6μl
    DEPC-treated Water———————————0.2ml

    储存条件:-20℃。



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