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- 服务名称:
荧光定量PCR
- 提供商:
华科鉴联基因科技
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荧光定量PCR检测
荧光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点,现在已经是生命科学领域的一项重要技术,并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。real-time qPCR输出的数据不同于常规PCR电泳检测,很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测,不知从何入手;甚至一些做过一些实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑。很多时候,尽管知晓qPCR的原理和基本操作,仍然浪费时间和精力,而得不到好的结果或对大量的数据不知所措。
华科鉴联基因科技提供的real-time qPCR技术服务,根据实验目的,设计实验方案(相对定量或绝对定量;SYBR Green I或Taqman探针方法),用完全按照符合国际标准(MIQE)的real-time qPCR试剂完成实验,提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。
服务要求
需提供新鲜或保存完好的细胞(至少5×106)、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料;或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好)或总DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好);或反转录好的cDNA不少于30μl(反转录的总RNA完整性好,纯度在1.9-2.1之间); 同时提供待测基因序列或登录号。
报告内容
荧光定量PCR实验报告包括总RNA(或DNA)浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及数据统计分析(可选),实验报告以及剩余引物和模板(华科鉴联基因科技可保存1个月)
实验报告部分组成
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文献和实验聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外扩增核酸片段的基因检测技术,具有简便易行、灵敏度高等特点。传统的PCR定量是应用终点PCR来对样品中的模板量进行定量,通常用凝胶电泳分离,并用荧光染料来检测PCR反应的最终扩增产物。但是普通PCR扩增已经满足不了分子生物学的研究,荧光定量PCR(Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction,QPCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,以其快速、特异性强、重复
视频要点如下: 1. 荧光定量的基础介绍 2.什么是PCR array 3.PCR array 数据解读
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。一、特点FQ-PCR不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于荧光探针的应用,可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术
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