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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 保质期:
,12个月
- 英文名:
Auxiliary precipitating nucleic acid reagent
- 库存:
847
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售核酸助沉剂(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:核酸助沉剂(国产,进口)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:ALH059
英文名:Auxiliary precipitating nucleic acid reagent
本品是一种分子生物学级Poly多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入5-10μl 本品即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到95~98%,同时可选择性去除短引物(<22bp)片段和dNTP,用于沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。与生物源性的核酸沉淀助剂如糖原和tRNA相比,本品本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。本品已成为最常用的核酸助沉剂。
产品特点:
1.明显提高DNA或RNA沉淀的得率。
2.痕量DNA和RNA(20pg)回收达95~98%。
3.不影响酶切、连接、转录、PCR等反应。
4.不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。
使用方法:
1. 提高DNA或RNA沉淀回收效率的使用方法:
①在1ml RNA 或者DNA 溶液中加入4-8 μl 本品,颠倒混匀。
②按照标准的乙醇沉淀法来沉淀RNA 或者DNA,如加入3M PH5.2 醋酸钠溶液(沉淀RNA 时应该使用无RNA 酶处理的溶液)到终浓度0.3 摩尔(约1/10 体积),然后加入2 倍体积的无水乙醇,混匀后室温或者冰箱放置10-30 分钟,12000 转离心10 分钟,弃上清,70%乙醇漂洗一遍,去上清,晾干沉淀,将沉淀重新溶解于适量DEPC 处理水(RNA 沉淀)或者其它如TE 缓冲液中。
2. 提高DNA或RNA产率的使用方法:
每一毫升总RNA提取试剂或者DNA提取试剂加入4~8μl本品。
注意事项:
本品会增加RNA 或者DNA 的光密度值,因此测量光密度值的时候,为了消除本品影响,应该按照同样的实验过程做一个空白对照样品(使用同样的试剂和本品,但是不含有RNA 或者DNA 样品,将最后的本品沉淀溶解在和样品一样的溶解液中)。测量样品和空白对照在260和280nm 的光密度值。将样品的光密度值减去空白对照的光密度值,便可以得到实际的样品的光密度值。如果定量不需要很精确,也可以估测。
储存条件:室温,12个月
本品别名:核酸助沉剂|核酸辅助沉淀剂|DNA助沉剂|RNA助沉剂
欲了解更多核酸助沉剂(国产,进口)的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)
编号:ALH033
英文名称:Universal Plant RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织RNA,使用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,DNase直接在柱上消化残留DNA,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的Beta-巯基乙醇,苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.配套DNase I 柱上消化,得到的RNA不残留DNase消化,可直接用于反转录荧光定量PCR、二代测序、芯片、RACE等实验。
4.世界领先,是同类产品中适应性最广泛的试剂盒,可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,无DNA残留,可直接用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 50次 |
| 裂解液RPA | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 40ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| DNaseBuffer | 1.25ml×2/td> |
| Rnase free DNaseI | 0.25ml |
| 吸附柱和收集管 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
3. 裂解液RPA和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
提示:第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶加入指定量无水乙醇!
1. 直接研磨法(推荐):
a. 新鲜植物组织称重后取100mg 迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg 放入研钵), 加入1 ml 裂解液RPA 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RPA 立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b. 将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15 秒,13,000rpm 离心5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片。
c. 取480μl 裂解物上清(在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。
2. 液氮研磨法:
a. 取500μl 裂解液RPA,转入1.5ml 离心管中。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg 细粉转入上述装有RPA 的离心管, 立即用手剧烈振荡20 秒,充分裂解。
c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
d. 将裂解物13000rpm 离心5-10 分钟,沉淀不能裂解的碎片。
e. 取裂解物上清(在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多的上清,这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
f. 立刻接操作步骤的步骤3。
注意:以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理,可以提高产量。也就是使用1ml 的裂解液RPA和100mg的样品。
3. 将混合物(每次小于720μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱 中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm 离心2 分钟,弃掉废液。确保离心后液体全部滤过去,膜上没有残留,如有必要,可以加大离心力和离心时间。
4. 加350μl 去蛋白液RW1,室温放置1 分钟,13,000rpm 离心30 秒,弃掉废液。
5. DNase I 工作液配制:取45μl DNase I buffer 和5μl RNase free DNase I 在离心管轻轻吹打混匀成工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。
6. 向吸附柱 中央加入50μl 的DNase I 工作液,室温(20-30℃)放置15 分钟。
注意:直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O 型圈或是离心柱管壁上。
7. 向吸附柱 中加入350μl 去蛋白液RW1, 12000rpm 离心30 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
8. 加入500μl 漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),13000rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl 漂洗液RW,重复一遍。
9. 将吸附柱 放回空收集管中,13000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱,放入一个RNase free 离心管中,根据预期RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在70-90℃水浴中加热可提高产量),室温放置1 分钟,12000rpm 离心1 分钟。
11. 如果预期RNA 产量>30μg,加30-50μl RNase free water 重复步骤10,合并两次洗液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA 浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液RNA浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
注意:如果不需要做荧光定量PCR,仅仅做普通的反转录,克隆基因片段,可以省略DNA 酶柱上消化的步骤,具体就是第4 步骤的“加350μl 去蛋白液RW1”改成“加700μl 去蛋白液RW1”,同时省略步骤5,6,7。
储存条件:室温,有效期12个月(DNase I及其Buffer需-20℃保存)
核酸助沉剂(国产,进口)关键词:RNA助沉剂,核酸助沉剂,DNA助沉剂,核酸辅助沉淀剂
·SYBR Green qPCR预混液
编号:ALH185
英文名称:2×SYBR Green qPCR Mix
规格:50μl×50次|50μl×200次
本品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。已经将热启动HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSA和SYBR Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。使用时只需加入模板和引物和水,便可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对目的基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。本品采用全新的Hotmaster Taq DNA 聚合酶,该酶不同于一般Hot-start 酶之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而Hotmaster Taq DNA 聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭Hotmaster Taq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。
试剂盒组分(50次):
2×SYBR qPCR Mix————————1.25ml
100×ROX参比染料————————25μl
注意事项:
1. 本制品含独立参比染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
2. 本制品含SYBR Green I 强光下易分解,降低敏感度,使用时避免长时间强光照射本制品。
3. 建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性,减少背景。
4. 本制品含有4 mM MgCl2(反应体系终浓度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 优化Mg2+浓度。
储存条件:-20℃,有效期半年。
核酸助沉剂(国产,进口)关键词:RNA助沉剂,核酸助沉剂,DNA助沉剂,核酸辅助沉淀剂
SJ0734 牛外周血细胞分离液
普鲁兰酶 TBAC 9075-68-7
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二甲基磷酸 DL-Valine 3283-12-3
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BTN130928 红细胞裂解液C型(核酸纯化) Red Cell Lysis Solution,Type C
ARB13506 鱼孕激素/孕酮(PROG)elisa检测说明书 Fish prog ELISA KIT
525-79-1 Kinetin 激动素
PY01-121 酸性蛋白酶(1:50000) 250克
BL1131 DH5α感受态细胞
脱氢乙酸 Glycine tert butyl ester hydrochloride 520-45-6
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