柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素) DNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素) DNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素) DNA纯化
规格：50次
品牌：百奥莱博
编号：ALH081
产地：国产|进口
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素，然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
平衡液—————————————5ml
RNaseA(10mg/ml)————————150μl
溶液P1—————————————15ml
溶液P2—————————————15ml
溶液N3—————————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独特的去蛋白液配方，可以高效去除核酸酶。即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.独特内毒素清除配方，清除内毒素效果一般小于＜0.1 EU/ug。
4.快速、方便， 不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，
5.直接可以用于转染、酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒，建议接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基， 过夜培养14-16个小时，可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应适当加大菌体使用量，使用5-10 ml过夜培养物，同时按比例增加P1、P2、N3的用量，其它步骤相同。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素)|无内毒素质粒提取试剂盒|高纯度无内毒素质粒制备试剂盒

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·植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
编号：ALH036
英文名称：Plant RNA Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织细胞总RNA，是在无苯酚、氯*(代"仿")RNA快速提取技术基础上，又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱，基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷，单个样品操作一般可在25分钟内完成，世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚，提高清除效果。
4.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性极其广泛，可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.2，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	20次	50次
裂解液RLT	20ml	50ml
裂解液CLB	8ml	8ml
裂解液RLT Plus	10ml	25ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-freeH2O	10ml	10ml
PLANTbalb	2ml	5ml
基因组DNA清除柱和收集管	20套	50套
吸附柱和收集管	20套	50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇，研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁，请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
6. 仔细阅读补充说明2，如果裂解液CLB效果好，可以联系我们单独订购裂解液CLB，或者购买试剂盒的时候，指明将裂解液RLT换成裂解液CLB。

储存条件：室温，有效期6个月。


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·植物miRNA提取试剂盒
编号：ALH073
英文名称：Plant microRNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒适用于快速提取植物microRNA或者microRNA/总RNA分别提取。采用分提取操作步骤也可单独纯化富集后的microRNA组分和总RNA（＞200 nt）从而得到分离富集的microRNA和RNA。试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后裂解混合物通过基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA（包括microRNA）被选择性滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗－离心的步骤,将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA（包括microRNA）从硅基质膜上洗脱。

传统的microRNA提取试剂盒均是采用异硫氰酸胍/苯酚/氯*(代"仿")（TRIzol法）加高浓度乙醇硅胶膜吸附小片段microRNA的原理方法制成，但是复杂的植物品类如棉花、葡萄、胡杨、冬青、月季、石斛、单参、水稻种子、人参、玉米胚芽等大量样品用TRIzol的原理甚至无法提取符合要求的总RNA，更不用说microRNA。世界著名公司采用Trizol法原理的microRNA提取试剂盒面临复杂植物样品时束手无策，产品线中干脆就没有复杂植物microRNA提取试剂盒。用户无奈只好用传统方法，或者TRIzol法提取，用异丙醇/乙醇沉淀方法来提取microRNA，虽然也能提取到部分microRNA，但是沉淀法损失巨大或者和杂质共沉淀，影响实验结果，在国际刊物投稿时常常面临质疑，甚至论文被撤销。而本试剂盒在公司全球领先数百种复杂植物提取的经验基础上（包括人参、雪莲、棉花、胡杨、冬青等各种复杂植物），创新性的采用了不用苯酚，氯*(代"仿")的技术路线全球首家解决该问题，可以提取绝大多数复杂植物如棉花、杨树、冬青、月季、丹参等植物microRNA，当然本试剂盒也适用于拟南芥、水稻、小麦、烟草、水稻等各种简单样品。

产品组分：
专用裂解液—————————50ml
植物RNA助提剂———————5ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
基因组DNA清除柱和收集管——50套
吸附柱和收集管———————50套

产品特点：
1. 完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3. 独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4. 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇，β-巯基乙醇，研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量
时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT Plus 和Wash Solution 1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），该产品由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，个别特殊情况需要清除微量基因组DNA残留，可使用以下几种DNA酶消化的方式。
1) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA，热灭活DNA酶后直接用于后续实验。
2) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA，然后使用RNA清洁纯化试剂盒（但是需要将说明书改动一个地方，第二步加入250μl无水乙醇改成加入700μl无水乙醇)清洁纯化后用于后续实验。
3) 直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒(但是需将说明书的去蛋白液RW1改成Wash Solution 1) 可先索取具体
操作说明书。
6. 碰到特别复杂多糖多酚，淀粉等次级代谢产物特别丰富的样品，如葡萄果实，水稻种子，裂解液RLT Plus效果不佳的情况下，应该购买专用裂解液CLB。裂解液CLB是本公司为特别复杂的多糖多酚植物样品研发的最强配方，绝大部分裂解液RLT Plus无法提取的复杂样品都可以提取成功。

储存条件：室温，有效期6个月。

北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品，欢迎来电咨询选购柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素) DNA纯化。