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载体pET-23d

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  • HZbscience
  • 中国/美国/德国
  • HZ0332
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    • 英文名

      pET-23d

    • 库存

      200

    • 供应商

      沪震生物

    • 规格

      5ug

    pET-23d

    产品信息

    产品货号 产品名称 产品规格 优惠价
    HZ0332 pET-23d

    20μl

    ¥请询价

    使用说明

    沪震质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。

    基本信息

    启动子: T7
    复制子: ColE1 ori,F1 ori
    终止子: T7 terminator
    质粒分类: 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
    质粒大小: 3663bp
    质粒标签: N-T7,C-6×His
    原核抗性: 氨苄青霉素Amp
    克隆菌株: DH5α
    培养条件: 37℃,有氧,LB
    表达宿主: BL21(DE3)
    诱导方式: 无需诱导
    5'测序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
    3'测序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
    备注: 组成型表达

    质粒简介

    The pET-23a-d( ) vectors carry an N-terminal T7•Tag® sequence plus an optional C-terminal His•Tag® sequence. These vectors differ from pET-21a-d( ) by the “plain” T7 promoter instead of the T7lac promoter and by the absence of the lacI gene. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer.
    产品细节图片1

    质粒图谱

    产品细节图片2

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    相关实验
    • 用于蛋白质表达和纯化的pET-32α(+)载体的构建

      加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备

    • IPTG诱导pET载体目的蛋白表达的原因分析

      相关专题 1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株,噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株,构建好的表达载体 可以直接转入表达菌株中,诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因,T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子,lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达; 3)表达质粒 如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏

    • 更快克隆出重组表达质粒

      中,现在Invitrogen已经克服了这个问题。在载体上多加四个碱基GTGG,就是这四个碱基使它可以与PCR产物定向连接。其作用机理见下图。 结合TOPO技术的有五个系列载体pET100/D-TOPO®、pET101/D-TOPO®、pET102/D-TOPO®、pET151/D-TOPO®和pET200/D-TOPO®,这五个载体根据所带的标记、是否具有蛋白酶切位点而各有不同。详细信息参见下图。 结合TOPO技术的有五个系列载体pET100/D

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