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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0505
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pMal-p2G
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pMal-p2G
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0505 | pMal-p2G | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Tac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 终止子: | rrnB T1 terminator |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；pMal系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 6724bp |
| 质粒标签: | N-MBP, N-Genenase I |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | BL21(DE3) |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | MalE引物: 5-GGTCGTCAGACTGTCGATGAAGCC-3;MBP-F: 5-gatgaagccctgaaagacgcgcag-3 |
| 3'测序引物: | pBad-5 5-gatttaatctgtatcagg-3; M13-F: 5-TGTAAAACGACGGCCAGT-3 |
| 备注: | 融合表达麦芽糖结合蛋白MBP，蛋白定位于细胞周质。 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验克隆载体 pRCII 转入大肠杆菌为例。TA 克隆载体 pRCII 含有 LacZ 基因，多克隆酶切位点位于其间，当没有外源基因插入 LacZ 基因中时，LacZ 基因的启动子可使此基因编码半乳糖苷酶，从而催化底物 X-gal 发生化学反应，菌落变成蓝色；当外源基因与 pRCII 载体发生连接时，LacZ 基因失活，菌落呈白色；同时该质粒还含有氨苄青霉素耐药基因。根据此特性，白色菌落含有重组质粒。在用这种质粒进行克隆时，转化平板培养基中要加入 0.5 mM IPTG、50 g/mL 氨
突变和化学修饰的耐受性，认为siRNA的5’端相对于3’端具有对突变的较高耐受性。有学者认为正义链3’突出端的任何碱基修饰对siRNA作用效果均无明显影响。还有学者认为与反义链互补的正义链3’端发生1—4个碱基的错配反而有助于增强RNAI的活性。二、siRNA制备方法目前为止较为常用的5种制备siRNAs的方法包括化学合成体外转录长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAsPCR制备
”自我连接、目标片段正向/反向插入傻傻分不清，徒增后面的筛选烦恼。做实验，有时真需要一点运气。 好运气不常有，合适的酶切位点跟合适的爱情一样不那么容易碰到。载体和片段的酶切位点难得一致——有时你有我无，有时前后顺序相反，有时两边全都对不上。但是“拼接”双方的任务是必须完成滴，运气不够就要靠技术和经验：有没有同裂酶？有没有能产生同样粘端可互补的酶——举例说 BamH I(G/GATCC)、Bcl I(T/GATCA)、Bgl II(A/GATCT)、Dpn II(/GATC)、BstYI(R
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