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细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与
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960
北京百奥莱博科技有限公司
20T|50T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与增殖,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与增殖品牌:百奥莱博规格:20T|50T编号:KFS314产地:国产|进口本试剂盒可应用于培养细胞(悬浮、贴壁)的DNA 含量(细胞周期)检测。细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制并加倍,且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期又可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA 合成前期(G1),DNA 合成期(S),DNA 合成后期(G2),整个周期可表示为G1→S→G2→M。DNA 周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况,即细胞增殖状况。利用细胞内DNA 能够和荧光染料(如碘化丙啶PI)结合的特性,细胞各个时期其DNA 含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样。细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核裂解,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对900 角光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向角和900 角光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。用PI 对细胞进行染色,凋亡细胞由于总DNA 量降低,于正常G0/G1 细胞群前出现DNA 低染细胞群,即G1 峰前出现亚二倍体峰(sub-G1),细胞凋亡群。细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与增殖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:·细胞核染料PI染色液(即用型)编号:KFS261规格:10ml|50ml荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来,从而区别鉴别出正常细胞、坏死细胞或检测细胞周期。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA 结合性染料,其激发和发射波长分别为536nm 和617nm,产生红色荧光,但无膜通透性,不能透过活细胞膜,只能染死细胞。因此,在荧光显微镜下观察,正常细胞不能着色,坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时,凋亡细胞因内源性核酸酶被激活,使DNA 广泛降解、断裂,DNA 结构发生剧变,随着凋亡的进程,DNA 断裂产生的小分子量DNA 溢出胞外,细胞总DNA 量降低,于正常G0/G1 细胞群前出现一DNA 低染细胞群,即G1 峰前出现亚二倍体峰(sub-G1)或称A0 细胞群,即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI 直接对细胞DNA 染色后,进行流式细胞仪分析,即可检测到凋亡细胞DNA 的变化。储存:2-8℃,避光,有效期6个月。细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与增殖关键词:KFS314,百奥莱博,细胞周期检测试剂盒·免疫染色封闭液编号:KFS009英文名称:Immunol Staining Blocking Buffer规格:100ml免疫染色封闭液可以用于免疫染色时切片或细胞样品的封闭。封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和样品的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。本免疫染色封闭液中含有适量Triton X-100,可以通透细胞膜。经本免疫染色封闭液处理的细胞样品可以检测细胞内的目的蛋白,包括细胞浆内和细胞核内的目的蛋白。按照每组样品封闭需要5-10 毫升封闭液计算,一个包装的免疫染色封闭液可以封闭10-20 组样品。操作方法:对于切片或细胞样品,在固定后用免疫染色洗涤液洗涤一次(注:石蜡切片需先脱蜡)。然后就可以用免疫染色封闭液进行封闭。通常建议封闭60 分钟。封闭时可以在摇床上缓慢摇动。如果样品在摇动时容易脱落,也可以直接放置在桌面上不进行任何摇动,效果会略差一些,但也可以满足常规的要求。完成封闭后就可以进行一抗孵育等后续操作。·活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)编号:KFS250英文名称:Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit规格:50T|100T细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象,二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时,细胞膜发生渗漏,细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程,起始阶段,染色质固缩、分离并沿核膜分布,细胞质亦发生固缩,但细胞膜依然完整未失去选择透性;在凋亡后期,核染色质断裂为大小不等的片断,与某些细胞器如线粒体一起聚集,为反折的细胞膜所包围,以后逐渐分离,形成凋亡小体。本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为:DyeReagent 1 只进入活细胞,正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色;Dye Reagent 2 只能进入死细胞,将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同,可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。注意事项1. Dye Reagent 1、2 及Mixed Dyes Reagent 有毒,操作时请戴手套;2. 最好根据需要检测的实际样品数在使用前将两种染料混合,剩余混合染液注意避光保存留待下次使用;3. 利用血球计数板进行该项操作时,不要用血计板配套的那种质地较硬的盖玻片,而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。操作方法1. 用适当的方法诱导细胞凋亡;2. 用PBS 洗涤细胞二次,并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液;3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent(见注意事项2);4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀;5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片,并用盖玻片盖上细胞(见注意事项3);6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察,分别对下列四类细胞进行计数,注意细胞总量须超过200 个。储存:2-8℃,避光,有效期12个月。细胞周期检测试剂盒 细胞凋亡与增殖关键词:KFS314,百奥莱博,细胞周期检测试剂盒·WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒编号:KFS319英文名称:WST-1 Cell Proliferation & Cell Viability Detection Kit规格:100T|500T叠氮类四唑盐是一种类似于MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶能够被还原成橙黄色水溶性的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。此法是用于测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度、高稳定性且无放射性的比色检测法。实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT, XTT, MTS 高,线性范围更宽。我司四唑盐对细胞无明显毒性。加入我司四唑盐显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。注意事项1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。2. 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有我司四唑盐的待测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入我司四唑盐,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl 培养基和10 μl 我司四唑盐进行检测。3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。4. 为保证您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。操作方法1. 96 孔板加入细胞100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2. 加入适当浓度的受试化合物。3. 将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。4. 向各孔中加入10 μl 的我司四唑盐工作液。5. 37℃下孵育1~4 小时。6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。结果分析1. 细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加我司四唑盐,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加我司四唑盐,无细胞),各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×1002. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
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