SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：SY0190
规格：1μg
OCT4-GFP报告基因是用于检测OCT4转录活性水平为目的的报告基因。Oct4是参与调控胚胎干细胞自我更新和维持其全能性的最为重要的转录因子之一，同时也是体外建立诱导多功能干细胞（iPS）的关键基因。

OCT4-GFP报告基因主要用于检测细胞中Oct4信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMOCT4-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个OCT4结合位点，可以高效地检测OCT4的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得OCT4-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM OCT4 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMOCT4-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

关于SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·Alexa Fluor 594标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号：SY0737
英文名称：Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗大鼠IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的大鼠IgG分子，也会与其他大鼠免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、兔和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red，Amax（最大激发波长）为591nm，Emax（最大发射波长）为614nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸钠，0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂：0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·组织/细胞线粒体分离试剂盒
编号：SY0328
英文名称：Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue
规格：50T
线粒体是绝大多数真核细胞内的一种基本的重要的细胞器，是细胞的动力工厂，细胞进行氧化磷酸化的场所。因此，对线粒体进行分离，以此为对象，对线粒体呼吸作用、mtDNA、mtRNA以及其他线粒体蛋白性能分析等具有重要意义。

本试剂盒可用于快速便捷分离组织/细胞线粒体，获得的线粒体纯度较高，且绝大部分都含有完整的内膜和外膜，可用于线粒体的生理功能等方面的研究，得到的线粒体也可被相应裂解液裂解得到线粒体蛋白，从而用于后续SDS-PAGE、Western、双向电泳及免疫共沉淀等分析。

按照每个样品使用量（细胞1-5×107个；组织：100-200 mg），本试剂盒可分别进行50个个样品的抽提。

试剂盒组份：
试剂A：100ml
试剂B：50ml
试剂C：1ml

储存条件：-20℃，有效期1年。

使用方法

1 线粒体的抽提
1）样本处理
① 组织匀浆：称取100-200 mg新鲜组织，PBS或生理盐水冲洗干净，滤纸吸干，用剪刀剪成非常小的碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1-2.5mL冰预冷的试剂A，混匀，孵育8-10min，匀浆10-30下左右，也可采用超声方法破膜。
② 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5-10 min收集细胞。计数，每次提取需要1-5×107个细胞，加入1-2.5mL预冷的试剂A，重悬细胞，混匀，孵育8-10min，可以采用超声或匀浆器方法破膜。
2）将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4 ºC，800 g 离心5 min。
【注】：细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等沉淀在管底。
3）收集上清液并转移到新的离心管。4 ºC，800 g 再次离心5 min。弃沉淀。
4）将上清液转移到新的离心管。4 ºC，12,000×g 离心10 min，小心去除上清，沉淀即为分离得到的细胞线粒体。
【注】：离心后的上清含胞浆成分，尽量除去上清。

2 线粒体蛋白的抽提
1）向每毫升预冷试剂B加入10μL试剂C混匀。冰上保存数分钟待用。
2）按每10μL线粒体压积中，加入100μL上述配制好的试剂B/C溶液。
3）置于4℃旋涡振荡15-30 min 。
4）10,000rpm，4℃离心15min，取上清，即为线粒体全蛋白提取物，进行蛋白定量。
5）分装保存于-70℃，避免反复冻融。


SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买关键词：Oct4 GFP Reporter Plasmid,Oct4-GFP报告基因质粒,SY0190


·1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)
编号：SY0321
英文名称：1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
规格：100ml
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（1×），裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 培养细胞样品：
1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。


SY0190型Oct4-GFP报告基因质粒哪里买关键词：Oct4 GFP Reporter Plasmid,Oct4-GFP报告基因质粒,SY0190


·Alexa Fluor 594标记驴抗鸡IgY(H+L)
编号：SY0741
英文名称：Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗鸡IgY（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子，也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red，Amax（最大激发波长）为591nm，Emax（最大发射波长）为614nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸钠，0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂：0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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