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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0694
- 2025年07月15日
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![载体pGL4.19[luc2CP/Neo]](https://img1.dxycdn.com/2017/0807/902/3225684616842628830-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pCold-MBP
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pCold-MBP
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0694 | pCold-MBP | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CSPA |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori，F1 ori |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；pCold系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 5505bp |
| 质粒标签: | N-Factor Xa，6*His |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pCold-F: 5-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3 |
| 3'测序引物: | pCold-R: 5-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验strep-tag 对 Strep-Tactin XT的亲和力，大规模纯化 CB2 蛋白；然后通过 WB 检测 MBP-CB2 的表达情况，G 蛋白激活实验检测 CB2 的功能活性。 3、CB2 蛋白的纯化的策略：根据不同构建载体表达的情况及 Strep-Tactin 亲和力的测试，作者通过串联亲和层析对 CB2 蛋白进行纯化，分别使用 C 端 His10 和 N 端 twin-Strep-tag。首先使用 Ni-resin 进行第一步纯化后，再从含有 CB2 蛋白的粗提物进行透析，用 TEV 蛋白
-MBP融合了麦芽糖蛋白,可用作对照载体和克隆载体(将目的基因克隆到pTWIN-MBP1 NcoI-SacI酶切位点之间,会在蛋白产物的N-端增加3个氨基酸,C-端增加23个氨基酸.) IMPACT系统利用的是T7启动子进行转录,在菌株中T7RNA聚合酶受到乳糖操纵子的调控.这一表达原理与Novagen的pET系列是一样的,NEB有提供自己的表达菌株ER2566,它也是lon和ompT蛋白酶缺陷型的,这点与BL21(DE3)也相同.它的基因表型如下：F�λ�fhuA2
了不同的内含肽2，pTWIN1用Mxe GyrA 内含肽(198 aa)作为内含肽2；而pTWIN2使用的是Mth RIR1 内含肽(134 aa)。然而，pTWIN1 和pTWIN2含有相同的多克隆位点，这样简化了将目的基因插入两个载体来选择最佳表达质粒的操作。pTWIN-MBP融合了麦芽糖蛋白，可用作对照载体和克隆载体(将目的基因克隆到pTWIN-MBP1 NcoI-SacI酶切位点之间，会在蛋白产物的N-端增加3个氨基酸，C-端增加23个氨基酸。)IMPACT系统利用的是T7启动子进行转录
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