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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0488
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pTf16
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pTf16
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0488 | pTf16 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 复制子: | p15A ori |
|---|---|
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；伴侣分子表达质粒 |
| 质粒大小: | 5kb |
| 原核抗性: | 氯霉素Chl |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 备注: | 伴侣分子表达质粒 |
质粒图谱
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文献和实验了这一过程。以下列出了其他一些策略，用于增加有问题的转录反应中的全长产物比例。 增加限制性核苷酸的浓度 用最低浓度的标记核苷酸进行转录反应，可能由于核苷酸浓度不足而产生过早终止的转录组。增加限制性核苷酸的浓度通常会提高全长转录组的产量。 降低反应的孵育温度 通常，转录反应在室温或 37°C 下进行。将温度降低至约 16°C 或甚至 4°C 有时可以改善转录反应。人们认为，较低的反应温度会减慢聚合酶的进展，从而防止其被二级结构或一个特定核苷酸串置换。（想象一下玩具火车全速绕弯前行与缓慢绕同一条路线前行
9 可能促进脱靶效应，这阻碍了其应用于需要高精确度的基因组编辑。而 IDLV 适合递送 Cas9 组分至静息细胞，更适合临床研究，目前已有相关研究成果发表。 作者设计了针对 GFP 的靶点，分别以 LV、IDLV 感染 HEK293T 细胞，在第 7 天提取细胞做全外显子组测序（WES）分析，鉴定出了 16 个基因存在脱靶 4： 载体构建示意图 WES 鉴定脱靶的基因 LV 诱导的插入缺失的频率在 3.4％-24％（深线），而 IDLV 显示出较弱的诱导脱靶插入缺失的能力 0％-6.5％（浅线
至总体积 10 ul混合后置 14～16 ℃ 水浴 6～12 h。【注意事项】1）通常 DNA 插入片段与载体 DNA 的摩尔比为 3:1 或 2:1，需根据 DNA 分子量计算，而不取决于浓度；2）平齐末端连接时，插入片段的量要远远大于载体 DNA 的量，可以为 5:1 或更多，即使这样，连接效率仍然很低。3）有时 DNA 一端是粘端，另一端是平端，这种连接与双酶切粘端连接相似；4）不匹配末端需要连接时，首先要将末端处理成平端，然后再进行连接反应。六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受
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