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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pTf16
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌分子伴侣载体 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5kb |
| 载体抗性: | chloromycetin (氯霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1306 | pTf16 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验了这一过程。以下列出了其他一些策略,用于增加有问题的转录反应中的全长产物比例。 增加限制性核苷酸的浓度 用最低浓度的标记核苷酸进行转录反应,可能由于核苷酸浓度不足而产生过早终止的转录组。增加限制性核苷酸的浓度通常会提高全长转录组的产量。 降低反应的孵育温度 通常,转录反应在室温或 37°C 下进行。将温度降低至约 16°C 或甚至 4°C 有时可以改善转录反应。人们认为,较低的反应温度会减慢聚合酶的进展,从而防止其被二级结构或一个特定核苷酸串置换。(想象一下玩具火车全速绕弯前行与缓慢绕同一条路线前行
9 可能促进脱靶效应,这阻碍了其应用于需要高精确度的基因组编辑。而 IDLV 适合递送 Cas9 组分至静息细胞,更适合临床研究,目前已有相关研究成果发表。 作者设计了针对 GFP 的靶点,分别以 LV、IDLV 感染 HEK293T 细胞,在第 7 天提取细胞做全外显子组测序(WES)分析,鉴定出了 16 个基因存在脱靶 4: 载体构建示意图 WES 鉴定脱靶的基因 LV 诱导的插入缺失的频率在 3.4%-24%(深线),而 IDLV 显示出较弱的诱导脱靶插入缺失的能力 0%-6.5%(浅线
至总体积 10 ul混合后置 14~16 ℃ 水浴 6~12 h。【注意事项】1)通常 DNA 插入片段与载体 DNA 的摩尔比为 3:1 或 2:1,需根据 DNA 分子量计算,而不取决于浓度;2)平齐末端连接时,插入片段的量要远远大于载体 DNA 的量,可以为 5:1 或更多,即使这样,连接效率仍然很低。3)有时 DNA 一端是粘端,另一端是平端,这种连接与双酶切粘端连接相似;4)不匹配末端需要连接时,首先要将末端处理成平端,然后再进行连接反应。六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受
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