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实验;其中,pA-Tn5 转座子使用的终浓度为 0.04μM ,N* 公司转座子按照 1:100 进行稀释,一抗 H3K27me3(CST,#9733),二抗为 Goat anti Rabbit(Bioworld,#BS13271)。使用 Agilent 2100 Bioanalyzer 比较 CUT&Tag 文库分布。 图 6. TD902 CUT&Tag 文库峰型图 图 7. N* 公司同类产品 CUT&Tag 文库峰型图 结果显示,Vazyme的pA-Tn5转座子切割活性
聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分离血清蛋白质(核黄素-TEMED聚合系统)(图)
于室温中赶尽氯仿(约得50g左右,M.P84.3℃),贮棕色瓶中,干燥低温保存(4℃)。 ②N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(Bis):分析纯。如不纯按下法处理:12g亚甲基双丙烯酰胺,溶于1000ml40~50℃丙酮。热滤,滤液慢慢冷至-20℃,结晶析出,砂芯漏斗吸滤,结晶用冷丙酮洗数次,真空干燥。贮棕色瓶,干燥低温(4℃)保存。 (注意:Acr和Bis都是神经毒剂,对皮肤有刺激作用,应在通风橱内操作。操作者需戴医用乳胶手套) ③N,N,N',N'-四甲基乙二胺(简称TEMED):密封
适用的分离范围也不一样。(via《分子克隆实验指南 第三版》)二、制胶这里以 1% 琼脂糖胶为例缓冲 TBE:Tris - 硼酸(TBE)使用液0.5X:0.045mol/L Tris - 硼酸0.001mol/L EDTA(pH8.0)储存液(1 000 ml)5X:54 g Tris 碱27.5 g 硼酸20 ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)TBE 尽量用 5X 储存,10X 的比较容易沉淀。染料:溴化乙锭或 SYBR GOLD制胶的第一步是选好梳齿,将胶架放上胶板,再放上梳齿
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