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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D9137
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Exonuclease III
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
2500U
核酸外切酶III
英文名：Exonuclease III规格：2500U
产品简介:
Exonuclease III(核酸外切酶 III)具有从双链DNA的3′-OH末端降解生成5’-单核苷酸的3′→5′外切酶活性。本酶对双链DNA具有高度特异性,能降解平滑末端、3′凹陷末端及有切口的DNA,但是不能降解3′-突出末端。所以,可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解(Double digestion)后,利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性,从一端降解,得到互补的单链DNA和
5′-P单核苷酸。与核酸酶相比,本酶的碱基特异性较小,如在富含GC的位置上,由于反应停止的机率较低,可用于DNA的Deletion制作。
本产品主要用途:
1.通过部分降解双链DNA片段,产生一部分单链DNA片段,作DNA聚合酶的底物(生成的DNA可用于双脱氧法序列分析)。
2.与单链特异性核酸酶(S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease)合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性,对于双酶切DNA片段(例如Eco R I-Pst I Fragment)能制作单向(Eco R I方向)缺失的DNA。
3.DNA-蛋白质相互作用分析。
活性单位定义:
以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
纯度:
1.50 U的本酶和1μg的Closed circular(RF I)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.50 U的本酶和1μg的pBR322-Pst I分解物在37℃下反应30分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0) 25 mM,KCl 50 mM,DTT 0.5 mM,Glycerol 50 % 。反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0) 500 mM,MgCl2 50mM,DTT 10 mM。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,半年以上长期保存时请在-80℃冷冻保存。
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21～23 bp)，即siRNA 。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即
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