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- 2026年01月29日
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文献和实验7-TerminatorpCAMBIA1301(1300)pCAMBIA1301-5'(ECORI)/M13RpCAMBIA1301-3'(HindIII)pCAMBIA1304pCAMBIA1301-5'(ECORI)pCAMBIA1301-3'(HindIII)pCAMBIA2300M13R(-48)M13F(-47)/M13F(-49)pCANTB5ES1S6pCAT3-enhancerRVP3此载体无反向引物pCDFDuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1 PrimerDuetDOWN1pCDFDuet-1(MCSII
(1300) P1 P2 pCAMBIA 2300 M13R(-48) M13F(-47) PCANTB5E S1/M13R S6 pCAT3-enhancer RVP3 此载体无反向引物 pcDNA3.0 CMV-F/T7 SP6/BGH pcDNA3.1 T7 BGH pcDNA4 T7/CMV-F BGH pcDNA6 T7/CMV-F(J21025在T7前面） BGH pcDNAII T7 SP6 pCE2.1 M13F M13R pCEP4 pCEP-F EBV-R
2.5×1010个细胞/ml）。分装，-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌，扩增，纯化。 3、将1-5ul （约1ug） 线性化的穿梭质粒及1ul（约100ng/ul）病毒骨架质粒（如pAdEasy-1）加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀，冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯，电击（1250-1500V/mm,5ms）。 5、电击结束取出样品，加入1ml SOC或LB培养液，37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性
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