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- 2025年11月06日
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文献和实验有用，因为这有可能阐明有关的途径，并确定功能基因网络。我们在HLR-CHOP细胞中进行siRNA筛选，以确定控制细胞周期调控和凋亡的基因。在两种筛选中，通过转染siRNA而下调基因，在细胞周期分析中在7-AAD染色后用流式细胞术分析对DNA内容的影响，在凋亡分析中分析对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3激活的影响。在细胞周期分析中，通过RNAi对DONSON和GDF3的下调导致细胞周期G1期的阻断。为了描述这两个基因在细胞周期调控中的进一步作用，我们在抑制DONSON和GDF3基因后用qRTPCR分析了一组91
一、设计原理 1、择合适的靶序列:设计引物之前，必须分析待测靶序列的性质，选择高度保守，碱基分布均匀的区域进行引物设计。 2,、长度：一般来说，寡核苷酸引物长度为15～30bp. 3、 Tm值：引物的Tm值一般控制在55～60℃，尽可能保证上下游引物的Tm值一致，一般不超过2℃。若引物中的G+C含量相对偏低，则可以使引物长度稍长，而保证一定的退火温度。 4、(G+C)含量:有效引物中(G+C)的比例一般为40～60%。 5、碱基的随机分布:引物中四种碱基的分布最好
完全培养基清洗细胞一次。 14、计算聚集体的数量，将聚集体用 Collagen I 溶液重悬并置于冰上，调整聚集体的密度为 40-60 个细胞团/50μl。 15、从培养箱中取出含有第一层胶原的 12 孔板，并小心地向 12 孔板的每个孔中添加 0.5 mL含细胞聚集体的 Collagen I溶液。前后晃动平板，使细胞均匀地分布在孔内。 16、将 12 孔板放置在 37℃ 条件下固化 2h。 17、加入预热的 3ml 血管分化培养基，放置在 37℃，5％CO2 培养箱中进行培养。血管芽会在培养
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