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上海一基实业有限公司
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文献和实验或者使用微量进样器直接在靠近点样孔底部的位置点样。 (5)冰浴中,恒压60~80V电泳约1.5h,至溴酚蓝指示带距底部约3cm处。 3、转膜 (1)电泳结束后,取出凝胶,浸入预冷的0.5XTBE缓冲液中。 (2)转膜所用的膜以及滤纸也需用0.5XTBE缓冲液浸湿(也可以事先用0.5XTBE缓冲液浸泡10min)。 (3)组装“三明治”,从负极(黑色)到正极(红色)依次为:滤纸、胶、膜、滤纸。 (4)组装转膜装置,确保装置所有正负极都连接正确。(这一点大多数人都知道,但在实际操作中往往
氨基甲烷(Tris)和48mL 1mol/l HCl 混合加水至100ml7. 试剂B(pH 6.7):5.98g Tris 和48ml 1mol/lHCl 混合加水至100ml8. 电极缓冲液:6.0gTris 和28.8g 甘氨酸混合加水至1000ml,用时稀释10倍9. 0.05%溴酚蓝10. 20%甘油11. 7%醋酸12. 1mol/l HCl13. 蛋白样品:人或动物血清四 、操作步骤1.垂直平板电泳槽的安装先把垂直平板电泳槽和两块玻璃板洗净,晾干。通过硅胶带将两块玻璃板紧贴于电泳槽(玻璃板之间留有
)4.04.04.04.04.04.04.04.04.04.04.0试剂蛋白 含量(mg)8.07.26.45.64.84.03.22.41.60.80注:1%牛血清白蛋白,经凯氏定氮测定含纯蛋白为80%。⑶ 混匀后于室温放置0.5h~1h,光电比色(540nm),顺序由低浓度至高浓度,每管测3次,求其平均值。⑷ 以OD值为纵坐标,蛋白含量为横坐标绘制标准曲线。4.样品测定⑴ 取样品0.1ml,加生理盐水1.4ml。也可将样品做1-10稀释加1ml,再加生理盐水0.5ml。⑵ 加双缩脲试剂4.0ml
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