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文献和实验mL、250mL容量瓶、250mL锥形瓶及50mL碱式滴定管等玻璃 仪器 ; 试剂 主要包括费林 试剂 及亚甲基蓝溶液等。 二、原理 本实验的主要原理:在加热条件下,用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时,将费林试剂中的二价铜还原为一价铜,以亚甲基蓝为指示剂,稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。通过实验,学习并掌握用费林试剂滴定法测定可溶性糖的原理和方法。 三、方法步骤
b. 把凝胶切成等距的薄片,洗脱,用生物化学方法作洗脱液的比色测定; c. 放射性同位素法,在样品中加入标记同位素,如?3 H、?14 C等,电泳后,用计数器测量放射活性,计算结果。 注意事项 1. 样品的离子强度、pH值尽可能与浓缩胶液相同,如含大量盐时,应经透析除盐。样品的蛋白浓度以1mg/ml为宜。 2. 丙烯酰胺和N,N亚甲基双丙烯酰胺的贮存液,会因水解后产生丙烯酸与氨而失效,也可因水解而变质。故应
)对上述两种方法进行了比较,发现两种方法所取得DNA之点杂交结果一致,非螺旋化DNA亦不影响杂交分析。 表18-5 Gpelz氏DNA提取方法的主要步骤 1.切除多余石蜡,暴露组织 2.将组织切碎(最大径℃ 放置24h,其制备见表18-6; 4.再次混悬组织,加入蛋白酶K至终浓度1mg/ml,SDS至2%,孵育40h; 5.用等体积酚-氯仿溶液抽提3次; 6.2.5倍体积乙醇沉淀DNA 7.-70℃放置2~4h 8.9000×g离心1h 9.沉淀物用70%乙醇洗1次 10.干燥
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