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文献和实验甲酸由酶促反应易与 N10 -甲酰 FAH4 ， N5·10 -次甲 FAH4 和 N5·10 -亚甲 FAH4 等间互相转移， C1 基即甲酰基，甲基，羟甲基或亚胺甲基（ -CH=NH）等的转移。在具有 c1 基中间产物的嘌呤和嘧啶核苷酸的合成，甘氨酸与丝氨酸的转换，组氨酸的分解等过程中具有辅酶的作用。在动物中，四氢叶酸是经由二氢叶酸的二个阶段还原反应而生成。氨甲蝶呤在此步骤中抑制辅酶的合成。在微生物中，二氢蝶酸和谷氨酸结合而生成二氢叶酸。
检测时，其灵敏度和定量与荧光基质底物4-MU（四甲基伞形酮）相关。 2 应用原理 4-MU酯类只有裂解之后才能产生荧光。进行荧光素酶检测主要基于以下原理：首先要水解含有4-MU的底物，比如β-葡萄糖醛酸酶水解β-4-MU-葡萄糖醛酸或β-Gal水解β-4-MU-半乳糖。β-Gal水解4-MU-β-D-半乳糖产生的荧光分子4-MU，在365nm激发时能在460nm处产生发射光。 Turner BioSystems
[Log(CPE低于50% 药物浓度)+距离比例×log稀释度间距]按此法计算上面例子：TC50=Antilog(1.7+0.14×0.3)=55.21不知道我这种算法是否可行，如果错了请大家原谅，小学数学一直不太好还有TC0是如何得到的，上面的例子中是不是可以认为TC0>12.5 mg/ml?TCID50=log（CPE高于50% 最高稀释对度）+距离比例×log稀释度间距计算累积感染百分率（阳性孔是从下往上累积，阴性孔是从上往下累积，计算累积的阳性孔的百分比）距离比例=（高于50% 的百分数-50
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