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- 中国大陆
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- 2025年07月14日
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- 保存条件：
低温运输,4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Proteinase K Solution
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1.5mL
蛋白酶K溶液
规格：1.5mL英文名：Proteinase K Solution
产品简介:
本产品是浓度为10 mg/mL的蛋白酶K溶液,可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。
蛋白酶K之所以广泛用于分子生物学研究,跟其三个特点密切相关。一个是较高的最佳反应温度(50-60℃),二是在pH 4.3-12的广泛范围内都有活性(最适为pH8.0),三是不受EDTA、尿素(1-4 M)、柠檬酸和碘乙酸的抑制,并且在0.5-1% SDS的溶液中其活性反而更高。由于EDTA和SDS是常用的细胞裂解液成分,所以细胞裂解和蛋白裂解可以合二为一,简化了操作。蛋白酶K具有两个 Ca2+,结合位点,在没有1-5 mM Ca2+存在时,其活性减低80%,酶的稳定性也降低。温度超过65℃后其活性也开始降低,95℃处理10分钟即彻底失活。
下面是蛋白酶K在各种应用中的反应条件:
应用蛋白酶K终浓度 反应温度 保温长度从细菌裂解液中制备DNA 100μg/mL 37℃ 1小时胚胎RNA原位杂交10μg/mL RT 15 分钟用组织和培养细胞制备PCR用的DNA 100μg/mL 50℃ 过了夜从病毒样品中纯化DNA 2 mg/mL 37℃ 4 小时酚抽提前酶解DNA中的蛋白质10-100μg/mL+SDS 37℃ 30 分钟
运输及保存:
低温运输,4℃保存,有效期一年。
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文献和实验与所有的化学平衡一样，当溶液的浓度、温度等条件改变时，弱酸、弱碱的解离平衡会发生移动。就浓度的改变来说，除用稀释的方法外，还可在弱酸、弱碱溶液中加入具有相同离子的强电解质以改变某一离子的浓度，从而引起弱酸或弱碱解离平衡的移动。例如，往 HAc 溶液中加入 NaAc ，由于 Ac - 离子浓度增大，使平衡向生成 HAc 的一方移动，结果就降低了 HAc 的解离度。又如，往 NH 3 水溶液中加入 NH 4 Cl ，由于 弱酸溶液中加入该酸的共轭
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
蛋白酶 K，威力巨大的广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。数年前首次使用它，是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头，效果不错；后来又用于处理 RNase-Free的水，效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开，与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时，直接用灭菌的双蒸水配制，最后，加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀，室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase：先将枪头及离心管清洗干净后，移入预先混好的含 1ug
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