- ￥1200
- TBD
- 天津
- LPZHY2014P
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
上海研谨生物科技
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物科技
- 规格：
3X200ml/Kit
产品编号：LPZHY2014P
产品名称：猪肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞分离液试剂盒
产品规格：3X200ml/Kit
产品价格：￥1200.00元
本品用于分离猪肿瘤组织淋巴、单核巨噬、粒细胞
“XXXX”动物肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞
分离液实验方法
技术文档编号：TBD0052SOP
【产品规格】
3×200ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
| 名称 | 产品编号 | 规格 | |
| A | 分离液 1 | 200ml | |
| B | 分离液 2 | 200ml | |
| C | 分离液 3 | 200ml | |
| D | 试剂 F（赠品） | F2013TBD | 200ml |
| E | 样本稀释液（赠品） | 2010C1119 | 200ml |
| F | 清洗液（赠品） | 2010X1118 | 200ml |
| G | 说明书 | 1 份 | |
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
- 首先制备组织单细胞悬液，制备方法详见“组织单细胞悬液制备技术”。取一支适当的离心管，依次小心加入分离液 1、分离液 2、分离液 3（体积比为 3:2:1，体积总量与组织单细胞悬液体积相等），制成梯度界面，各液面分层一定要清晰。（如组织单细胞悬液样本量为 6ml，则加入分离液 1：3ml、分离液 2：2ml、分离液 3：1ml。）
- 用吸管小心吸取组织悬液样本加于分离液液面上，400-500g，离心 20-30min（注：根据组织悬液样本量确定离心条件，样本量越多，离心力越大，离心时间越长，最大离心力可达 1200g，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
- 离心后，此时离心管中将出现两层环状乳白色细胞层。
- 用吸管吸取两层环状目的细胞层（如有红细胞混杂则需用红细胞裂解液（需另购）裂解
红细胞，具体操作说明详见“红细胞裂解液使用说明”）到 15ml 离心管中，往所得离心
- 250g，离心 10min。
- 弃上清。
- 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。
- 250g，离心 10min。
- 重复 6、7、8，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
【注意事项】
- 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取样 2h 内进行实验，样品存放时间越长，细胞分离效果越差。样品放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
- 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
- 如所实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。
【参考值（参考范围）】
本实验肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞提取率大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
| 红细胞 | 白细胞 | 血小板 | |||
| （4.0-10.0）×109 | |||||
| 含量（个/L） | （4.0-5.5）×1012 | 中性粒细胞 | 淋巴细胞 | 单核细胞 | （1.0-3.0）×1011 |
| 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |||
| 【相关实验技术方案】 | |||||
- 组织单细胞悬液制备技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的培养技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的核酸提取技术。
- 所获得肿瘤组织淋巴细胞、单核巨噬、粒细胞的鉴定方法
A.流式细胞技术
B.免疫组化技术
C.原位杂交技术
D.PCR 技术
【可能存在的问题及解决方法】
1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示：
| 出现情况 | 出现原因 | 建议解决方案 |
| 离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层 | 转速过小或离心时间过短 | 适当增减转速 |
| 离心后目的细胞存在于分离液中 | 转速过大或离心时间过长 | |
| 离心后白环层弥散 | 细胞密度过大 | 调整细胞密度 |
| 离心后白环层太浅或看不见 | 细胞密度过小 | |
- 本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。
- 本分离液依照国际标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可能出现红细胞沉降不完全的情况，可以适当加大离心转速。
注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到最佳分离效果，
离心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
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文献和实验性的损伤。 4） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 IPHASE/汇智和源针对不同种属动物骨髓单个核细胞分离的特点，开发了对应的单个核细胞分离试剂盒，包括人，猴，犬，大鼠，小鼠，兔，猪等。该试剂盒包含单个核细胞分离液和洗涤液两个组分，各成分对细胞无毒性，不会影响细胞的原始状态；同时，该试剂盒操作简单便捷，可大大缩短细胞分离时间，分离所得细胞纯度高、状态好、得率高。 关 于 我 们 汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物
g/mL，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。 人 PBMC 中不同细胞类型的比例 PBMC 中大部分都是淋巴细胞，包括 B 细胞和 T 细胞，其中 CD3 T 细胞又占了淋巴细胞中绝大部分 (45 - 70%)。这些 T 细胞都处于初始（naive）状态，即已经成熟了但没有受到抗原
人CD3+T淋巴细胞阳性分选原理及注意事项 一、细胞分选方法概述 细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究，如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。 细胞分选（cell sorting）是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术，它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。常用
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