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- 天津
- NK2011H
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
12个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物科技
- 规格：
100ml/Kit
产品编号：NK2011H
产品名称：人富含NK活性大颗粒淋巴细胞（LGL）的纯化试剂盒
产品规格：100ml/Kit
产品价格：￥400.00元
本品用于分离人外周血NK细胞
人富含 NK 活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化试剂盒实验方法
【产品规格】
100ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
| 名称 | 产品编号 | 规格 | |
| A | 密度梯度分离液原液 | NK2011H-A | 100ml |
| B | 梯度制备稀释液 | NK2011H-B | 100ml |
| C | 说明书 | 1 份 | |
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
- 收集从外周血中分离的单个核细胞（人全血单个核细胞分离液，产品货号；LDS1075）： 1×108 个悬于 1ml 无血清培养基中。
- 梯度分离溶液制备，使用使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度：
| 原液浓度（%） | 83% | 79% | 73% | 70% | 66% |
| 比重（g/ml） | 1.067 | 1.064 | 1.061 | 1.058 | 1.056 |
- 梯度分离层的制备：将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至 10ml 离心管（试管）内，每层约 1.2-1.5ml 加入后应可见明显的梯度界面，同时标记 70%层上部界面及 73% 底部界面位置。
- 上样：将单个核细胞单细胞悬液 1ml 加至梯度界面上。
- 离心：400g，离心 20-25min。
- 取样：吸取 73%与 70%溶液界面及上下两层分离溶液（即步骤 3 标记位置之间的溶液），
细胞经洗涤后供后续试验。
注：样本量加大时请客户按选取对应耗材且按比例增加试剂用量，但应注意加入试剂及样本
后总体积不超过离心管总体积的 2/3。
【注意事项】
- 实验全过程需在 20℃±2℃下进行，否则影响离心效果。
- 由于多层分离溶液之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
3. 试剂瓶盖需盖紧，防止蒸发和污染。
【储存条件及有效期】常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
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文献和实验从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程
TIL 细胞分选工作流程，解决实验瓶颈：即如何将小鼠肿瘤组织高效的分离成单细胞悬液、磁珠预富集 CD45+ TIL 细胞，然后从同一样品中依次分选高纯度和高活性的 TIL 细胞亚群。 分离高纯度、高活性的 TIL 细胞亚群的工作流程 1. 肿瘤分离 利用带有加热装置的八通道全自动组织解离器 gentleMACSTM Octo 和小鼠肿瘤分离试剂盒分离 1g 小鼠肿瘤组织。 2. CD45+ TIL 的免疫磁性预富集 为了提高目标 TIL 细胞的频率及纯度，从肿瘤分离出来的单细胞悬浮液中， TIL
Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。 举例： 1. 富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化：按顺序由下向上逐层加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五种不同密度的Percoll，如用10mL试管(或塑料管)分离，每层Percoll约1.2～1.5mL，初步从外周血中分离的PBMC细胞1×108 悬于1mL培基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5％与45％Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
；细菌夹膜 机体 IgM抗体 激活补体 CR 吞噬。 四、 NK细胞 (natural killer cell，自然杀伤细胞)NK细胞一经识别病毒感染细胞后，即可发挥杀伤作用，与T、B淋巴细胞不同。 特点：缺乏T细胞和B细胞的特征--无TCR基因和Ig基因重排和表达。 大颗粒淋巴细胞(large granular lymphocyte, LGL)分布： 约占外周血中淋巴细胞总数的5％～10％；脾中占1％～2％；淋巴
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