- ￥1050
- TBD
- 天津
- WBC1090G
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
12个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物科技
- 规格：
200ml/KIT
产品类别：外周血白细胞的分离
产品编号：WBC1090G
产品名称：鹅外周血白细胞分离液试剂盒（分子生物学及细胞培养专用）
产品规格：200ml/KIT
产品价格：￥1050元
本品用于分离鹅外周血白细胞
“XXXX”动物外周血白细胞分离液实验方法
（细胞培养及分子生物学专用）
技术文档编号：TBD0031SOP
【产品规格】
200ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
| 名称 | 产品编号 | 规格 | |
| A | XXXX 动物外周血白细胞分离液 | 200ml | |
| B | 样本稀释液（赠品） | 2010C1119 | 200ml |
| C | 清洗液（赠品） | 2010X1118 | 200ml |
| D | 红细胞裂解液（赠品） | NH4CL2009 | 100ml |
| E | 说明书 | 1 份 | |
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
首先取抗凝血，根据样本量大小，分以下两种情况：
情况 A：血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：
- 取一支 15ml 离心管，先加入 5ml 分离液
- 用吸管小心吸取血液样本加于分离液液面上，500-800g，离心 20-30min（注：如改变血液样本及分离液用量，需相应调整离心力及离心时间，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果。）
- 离心后用吸管小心吸取所有环状乳白色细胞层（一层或两层），加入 10 ml 清洗液（产品编号：2010X1118），混匀细胞。250g，离心 10min。重复洗涤 2-3 次，即得所需白细胞。
- 如有红细胞残留请使用红细胞裂解液（产品编号：NH4CL2009）裂解红细胞，具体操
作方法详见“红细胞裂解液使用说明”。
情况 B：血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：
- 取一支适当的离心管，先加入与样本等量的分离液。
- 将血液样本小心加于分离液之液面上，550-850g（最大离心力可至 1000g），离心20-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果。加入血液样本后，样本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。
- 剩余步骤同“情况 A”中步骤 3 与步骤 4。
【注意事项】
- 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
- 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
- 分离液用量大于稀释后血液样本时，分离效果更佳。
- 当血液样本粘度过高需稀释时，最优稀释方法：将血液与样本稀释液（产品编号：2010C1119）1:1 稀释混匀备用。注：不当的稀释方法会降低细胞得率及活性。如血液样本经过稀释则分离过程中需适当降低离心力和离心时间。
- 如实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
【参考值（参考范围）】
本实验白细胞提取率及纯度大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
| 红细胞 | 白细胞 | 血小板 | |||
| （4.0-10.0）×109 | |||||
| 含量（个/L） | （4.0-5.5）×1012 | 中性粒细胞 | 淋巴细胞 | 单核细胞 | （1.0-3.0）×1011 |
| 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |||
【相关实验技术方案】
- 所获得白细胞的培养技术。
- 所获得白细胞的核酸提取技术。
- 所获得白细胞的鉴定方法A.流式细胞技术B.免疫组化技术
D.PCR 技术
【可能存在的问题及解决方法】
1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示：
| 出现情况 | 出现原因 | 建议解决方案 |
| 离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层 | 转速过小或离心时间过短 | 适当增减转速 |
| 离心后目的细胞存在于分离液中 | 转速过大或离心时间过长 | |
| 离心后白环层弥散 | 细胞密度过大 | 调整细胞密度 |
| 离心后白环层太浅或看不见 | 细胞密度过小 | |
- 本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。
- 本分离液依照国际标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可能出现红细胞沉降不完全的情况，可以适当加大离心转速。
注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到最佳分离效果，
离心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
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文献和实验）； 4.离心后，离心管中样品由上到下分为 4 层：血浆层-白膜层-人淋巴细胞分离液层-红细胞与粒细胞的沉淀。分别小心吸取白膜层及其以下约一半的液体于新的离心管中，并加入生理盐水或PBS至40mL体积，混匀，300g离心10min； 5.弃上清，沉淀再次用40mL的生理盐水或PBS重悬，300g离心10min； 6.弃上清，沉淀少许NK-IV培养基重悬，合并，取部分细胞悬液计数，备用。 三 单个核细胞接种与补液 1.T75瓶包被 将7mL PBS加入到T75细胞培养瓶中，再将NK-I加入到T
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物-靶细胞复合物，去除杂质。在这个过程中，可直接将磁性复合物-靶细胞复合物用来进行细胞培养，也可以裂解细胞，通过色谱分析、电泳或等方法分析细胞内容物。 第三步，磁性标记物与靶细胞的分离、移除。将磁性标记物与靶细胞分开，通过磁性分离去除磁性标记物，释放靶细胞，以便后续实验的进行。 免疫磁性细胞分选应用 作为细胞生物学研究的前提和基础，细胞分选技术已经得到了广泛的应用。随着细胞分选技术的不断发展，免疫磁性细胞分选技术已越来越受到研究者的的认可，目前已有许多商业化的试剂盒和分选
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