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- 中国大陆
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- 2025年07月12日
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长期
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5KU
T4 RNA 连接酶 1(ssRNA 连接酶) 高浓度
特性:连接单链 RNA 和 DNA
用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
合成单链寡脱氧核苷酸
蛋白质中掺入非天然氨基酸
概述:
催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
来源:
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。
热失活:65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。
使用注意事项:
pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。
随酶提供试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（M0204）或 100 mM ATP（M0437）50% PEG 8000
质保声明:
无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
10,000 或 30,000 units/ml。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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