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- DC653
- 2025年07月11日
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- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
血管
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
见说明书
- 器官来源：
血管
- 运输方式：
长温运输
- 年限：
永久
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
1*10（6）/ml
问题1：培养液pH 值变化太快
可能原因
（1）CO2 张力不对
（2）培养瓶盖拧得太紧
（3）NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足
（4）培养液中盐浓度不正确
（5）细菌、酵母或真菌污染
建议解决方法
（1）按培养液中NaHCO3 浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度，2.0g/L 到3.7g/L 浓度NaHCO3 对应CO2 浓度为5％ 到10％。
（2）松开瓶盖1/4 圈。
（3）改用不依赖CO2 培养液。加HEPES 缓冲液至10 到25mM 终浓度。
（4）HemECs(人血管瘤内皮细胞)在CO2培养环境中改用基于Earle′s 盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks 盐配制的培养液。
（5）丢弃培养物，或用抗生素除菌。
问题2：培养液出现沉淀，但pH值不变
可能原因
（1）洗涤剂清洗后残留有磷酸盐，将培养基成分沉淀下来
（2）冰冻保存培养液
建议解决方法
（1）用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后灭菌。
（2）将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。
问题3：培养液出现沉淀， 同时pH 发生变化
可能原因
细菌或真菌污染
建议解决方法
丢弃培养物，或用抗生素除菌。
问题4：培养细胞不贴壁
可能原因
（1）胰蛋白酶消化过度
（2）支原体污染
（3）培养瓶瓶底不干净
（4）培养液pH值过碱（NaHCO3分解）
（5）消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当
（6）细胞老化（如传代前细胞已汇合导致失去贴附性）
（7）接种细胞起始浓度太低或太高
建议解决方法
（1）HemECs(人血管瘤内皮细胞)缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。
（2）分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。
（3）注意刷洗，或换用一次性塑料培养瓶
（4）使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2（将培养液敞口放入培养箱也可）
（5）重新配置消化液或培养液
（6）启用新的保种细胞
（7）调节最佳接种细胞浓度
问题5：悬浮细胞成簇
可能原因
（1）培养液中含钙、镁离子
（2）支原体污染
（3）蛋白酶过度消化使得细胞裂解释
（4）DNA污染
建议解决方法
（1）用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液。
（2）分离培养物，检测支原体。如发现支原体污染，丢弃培养物。
（3）用DNase I 处理细胞。
问题6：原代细胞培养物污染
可能原因
原代培养组织在进入培养前已污染
建议解决方法
培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。
问题7：培养细胞生长减慢
可能原因
（1）由于更换不同培养液或血清
（2）培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。
（3）培养物中有少量细菌或真菌污染
（4）试剂保存不当
（5）接种细胞起始浓度太低
（6）细胞已老化
（7）支原体污染
建议解决方法
（1）HemECs(人血管瘤内皮细胞)比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。让细胞逐渐适应新培养液。
（2）换入新鲜配制培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子。
（3）用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物。或用抗生素除菌。
（4）血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2－8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2 周内用完。
（5）增加接种细胞起始浓度。
（6）换用新的保种细胞。
（7）分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。
问题8：培养细胞死亡
可能原因
（1）培养箱内无CO2
（2）培养箱内温度波动太大
（3）细胞冻存或复苏过程中损伤
（4）培养液渗透压不正确
（5）培养液种有毒代谢产物堆积
（6）更多原因参考问题4和问题7
建议解决方法
（1）检测培养箱内CO2
（2）检查培养箱内温度
（3）取新的保存细胞种
（4）检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350 mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。
（5）换入新鲜培养液
（6）更多解决方法参考问题4和问题7.
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文献和实验血管瘤是先天性良性肿瘤或血管畸形，多见于婴儿出生时或出生后不久，它起源于残余的胚胎成血管细胞，发生于口腔颌面部的血管瘤占全身血管瘤的６０％，其中大多数发生于颜面皮肤、皮下组织及口腔粘膜、如舌、唇、口底等组织，少数发生于颌骨内或深部组织。 血管瘤按其临床表现及组织学特征一般可分为毛细血管型血管瘤、海绵状血管瘤及蔓状血管瘤，其中以毛细血管瘤及海绵状血管瘤较常见。 临床表现 一、毛细血管型血管瘤，由发育异常的扩张的毛细血管构成。 1.多发于颜面部及口腔
血管瘤是由胚胎期间血管细胞增生而形成的常见于皮肤和软组织内的良性肿瘤。血管瘤因结构形态的不同，可分为毛细血管瘤、海绵状血管瘤、蔓状血管瘤和混合型血管瘤。各种类型的临床表现不尽相同，若血管瘤包含有其他组织成分，如淋巴管，脂肪或纤维组织，分别称为淋巴血管瘤，脂肪血管瘤或纤维血管瘤。无恶变，但可出现压迫症状。 该病最常发生在头、面、颈部，次为四肢、躯干等部位。病因有二：错构瘤或胚胎期间血管系统的发育失常所致。临床诊断较为明确。治疗则分为非手术治疗和手术疗法。两者都有良好疗效
本病是较为常见的眼睑良性肿瘤。多认为由于胚胎发育过程中血管异常增生所致，故多出现在新生儿及婴幼儿。有的病例可在５－７岁内自行消退。究竟能否消退，实难预估。临床上多见逐渐长大，尤其６个月内的病例常有迅速发展，不仅出现睑下垂致弱视并影响面容及表情，甚至可因外伤而出血或感染。故多主张积极治疗。 眼睑血管瘤分为毛细血管瘤和海绵状血管瘤、混合型和鲜红斑痣四型。 临床表现 1.毛细血管瘤（又称草莓状痣）：扁平稍隆起，鲜红或紫色，境界清楚，压之可退色，深部可并发海绵状血管瘤
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