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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
上海研谨生物
- 细胞类型:
细胞株
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 器官来源:
骨肉瘤
- 运输方式:
常温、冷冻
- 生长状态:
贴壁
| 规格: | 产品价格: | ¥800.0-¥2800.0 | |
|---|---|---|---|
| 规格: | 产品价格: | ¥800.0-¥2800.0 |
细胞代号:【MG-63】
培养条件:[MEM+10% FBS]
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人骨肉瘤细胞(MG-63)
货号:HMCL-014
细胞介绍
用聚次黄嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸,放线菌同酮和放线菌素D可以诱导产生高水平的干扰素。
细胞特性
- 来源:骨肉瘤
- 形态:成纤维细胞
- 含量:>1x106 个/mL
- 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
- 准备MEM培养基(MEM,GIBCO),90%;胎牛血清,10%。
- 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
- 细胞处理:
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
- 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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