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文献和实验1D4系统的最大优势在于抗体与抗原相互作用的高度特异性。表位序列和链长对结合至关重要。例如,将第三位丙氨酸替换成甘氨酸,即移去一个甲基基团,抗体将不再与表位结合。同样,完整的九个氨基酸标签会与Rho1D4抗体结合紧密,去除两个氨基酸则阻断结合。因此,含有与Rho1D4表位相似序列的蛋白引起的非特异性结合被最小化,因此回收蛋白的纯度非常高。(见表1) 3,4,5,6,7,8高回收量而Rho1D4系统的另一个优势是洗脱目标蛋白的高回收率。包括细菌,酵母和哺乳动物细胞系在内的表达系统已经针对特定的GPCR
与翻译是连续进行的,往往转录还未完成,翻译已经开始了,因此原核生物中转录生成的mRNA没有特殊的转录后加工修饰过程。 真核生物转录生成的mRNA为单顺反子,即一个mRNA分子只为一种蛋白质分子编码。 真核生物mRNA的加工修饰,主要包括对5’端和3’端的修饰以及对中间部分进行剪接。 1.在5’端加帽 成熟的真核生物mRNA,其结构的5’端都有一个m7G-PPNmN结构,该结构被称为甲基鸟苷的帽子。如图17-9所示。鸟苷通过5’-5’焦磷酸键与初级转录物的5’端
开始了,因此原核生物中转录生成的mRNA没有特殊的转录后加工修饰过程。 真核生物转录生成的mRNA为单顺反子,即一个mRNA分子只为一种蛋白质分子编码。 真核生物mRNA的加工修饰,主要包括对5’端和3’端的修饰以及对中间部分进行剪接。 1.在5端加帽 成熟的真核生物mRNA,其结构的5’端都有一个m7G-PPNmN结构,该结构被称为甲基鸟苷的帽子。如图17-9所示。鸟苷通过5’-5’焦磷酸键与初级转录物的5’端相连。当鸟苷上第7位碳原子被甲基化形成m7G-PPNmN时
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