手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
最低0元起分子/检测服务
企业认证
点击 QQ 联系
分子服务预实验
锐赛
qPCR检测
PCR Detection
实验原理
通过qPCR准确进行miRNA在细胞或组织样本中的表达分析是研究miRNA功能的基础。将小片段的miRNA通过聚合酶A加尾,再通过含有通用序列的Oligo序列进行反转录,合成特异性的miRNA引物及通用引物即可对miRNA进行qPCR检测工作。
实验流程
实验结果展示
1)目的基因hsa-miR-9-1 的扩增曲线和熔解曲线;2)内参基因人 snRNA U6的扩增曲线和熔解曲线;
3)hsa-miR-9-1 在不同样本中的qPCR相对定量检测柱形图。
甲基化检测
Methylation Detection
DNA甲基化存在于大多数真核生物中,一般发生在CpG双核苷酸中胞嘧啶的5’UTR区,起调控作用。CpG的胞嘧啶大概有80%被甲基化,20%处于基因调控区的CpG岛中。BSP甲基化测序(Bisulfite Genomic Sequencing PCR)的原理通过对基因组DNA进行重亚硫酸盐处理,非甲基化的胞嘧啶被脱氨基而转变成尿嘧啶,在随后的PCR反应中尿嘧啶转变成胸腺嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不能被脱氨基,在反应完成时被保留(见下图),我们将扩增得到的PCR产物进行TA克隆测序,就可以分析甲基化发生的具体情况。该方法实验结果准确性高,是甲基化检测的金标准。
图1 三样本的甲基化结果圈点图分析
注:图中有三个样本,每个样本含5个克隆测序结果,共计15个测序结果。每个圆圈代表一个CG位点,黑圈代表甲基化,白圈代表未甲基化;每一行代表一个样本TA克隆的一个测序结果,序列中所有的CG位点情况可被被罗列,此例序列中共含有31个CG位点。
SNP检测
SNP Detection
单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)是指基因组上单个核苷酸的变异,人类基因组平均每1000个就有一个SNP。它是由基因组DNA某一特定核苷酸位置上单个碱基的转换、颠换、插入或缺失引起的点突变,使得群体之间和个体之间产生了差异。其中转换和颠换发生频率较高,转换是指同型碱基之间的转换,即嘌呤与嘌呤、嘧啶与嘧啶间;颠换是指发生在嘌呤与嘧啶之间的替换。事实上转换的发生频率占多数,且CG序列上出现的SNP最为频繁,而且多是C转换为T,原因是CG中的C常因为甲基化自发地脱氨基后即成为胸腺嘧啶。
图1 目的基因 SNP 测序结果
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
马上登录 或注册,即可保存询价历史