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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
两年
- 英文名:
Reductant-Compatible BCA Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
250次
还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒
英文名:Reductant-Compatible BCA Kit规格:250次
产品简介:
本产品是用于含有还原剂的蛋白溶液定量的专用产品,它具有下列特点:
1.与5 mM DTT,35 mM 巯基乙醇或10 mM TCEP 兼容。
2.无需蛋白沉淀。
3.线性工作范围:125-2,000 微克/ 毫升。
4.样品体积: 25 微升。
5.与多数离子型或非离子型去污剂兼容。
6.比基于考马斯(Bradford)测定方法的蛋白间差异更少。
7.比色法,在562 纳米除读数。
8.使用方便。
运输及保存:
常温,有效期两年(但BSA标准需要-20℃保存)。
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文献和实验目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
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