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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液态/冻干粉
- 保存条件:
-20℃保存
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
FITC
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-1433 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.
- 浓度:
970mg/ml
- 抗体英文名:
MAN1
- 规格:
0.1ml 0.935ml
【抗体的鉴定】
筛选杂交瘤细胞通过选择性培养而获得杂交细胞系中,仅少数能分泌针对免疫原的特异性抗体。一般在杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时,即可开始检测特异性抗体,筛选出所需要的杂交瘤细胞系。
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同,选择不同的筛选方法,一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。
【抗体溶解方法】
方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,最好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。
后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:
1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.
2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.
修复液:0.01M 枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
【抗体修复方法】
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;
使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)
【溶液配制】
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;
使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
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文献和实验英泰两国研究人员联合在新一期《科学》杂志上发表论文称,人体免疫系统在对抗登革热病毒时所产生的前体膜蛋白(prM)抗体,会在患者第二次感染登革热时帮助病毒感染更多细胞,从而使症状更加严重。研究人员称,该发现提供的关键信息有助于科学家尽早研制出新型登革热疫苗。 论文称,英国伦敦帝国理工大学与泰国玛希顿大学及有关医院的研究人员合作,在分析了登革热患者血液样本中的病毒抗体后得出以上结论。人体免疫系统在对抗登革热病毒时会产生一系列抗体——前体膜蛋白(prM)抗体。新研究表明,当曾感染过登革
实验室中时常听到这样的困惑,「明明通过免疫荧光(IF)能看到目的蛋白表达在细胞核膜上的表达,但为什么不论用总蛋白还是核蛋白进行 WB 检测,都无法检测到目的蛋白?」 类似这样的问题,你是否也深有感触? 实际操作过程中,是否遇到过免疫荧光有结果而蛋白印迹却没条带的情况?什么原因导致了这种情况?又该如何处理? 一、IF & WB 免疫荧光(IF)和免疫印迹(WB)都是利用抗原和抗体的特异性结合对目的蛋白质进行检测。IF 采用抗体和荧光检测固定细胞或组织中目的
是你实验过程中的问题。每次实验注意做对照。另外,你的b-catenin的表达是过量表达还是内源的呢?如果内源,适当增加点上样量看看。抗体也需要注意。总之,一切小心,呵呵。 familar woxingwosu wrote: 不一定要提核蛋白才能出来。b-catenin在核内核外都有分布。应该是你实验过程中的问题。每次实验注意做对照。另外,你的b-catenin的表达是过量表达还是内源的呢?如果内源,适当增加点上样量看看。抗体
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