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冷藏
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长期
- 英文名:
Non-denatured Gel Sample Loading Buffer,5X)
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大量
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康朗生物
- 规格:
2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)
规格:2ml英文名:Non-denatured Gel Sample Loading Buffer,5X)
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(,是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
本产品中不含SDS等变性试剂,但含有还原性试剂DTT。
可以用于常规的非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。
保存条件:
-20℃保存,至少一年有效。
注意事项:
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
使用说明:
1. 按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。直接上样到PAGE胶加样孔内即可。
2. 通常电泳时蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
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文献和实验关于<非变性/native-PAGE及相关的蛋白回收>帖子总结.
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关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
5倍体积的浸提液,4 ℃过夜,期间振摇3~4次。5. 第二天,4 ℃,10000 r/m离心10 min,留取上清。6. 使用透析袋,在相应的缓冲液中,4 ℃透析24—48小时7. 进行SDS-PAGE电泳鉴定和蛋白含量测定。注意事项:(切记!)回收前蛋白若为包涵体形式,回收后透析时透析液应加相应变性剂,以免沉淀。将胶在1mM DTT,20mM MgCl2种浸泡4h或过夜,将目的条带切下,置透析带中,电泳,然后收集上清液即为目的蛋白。Native PAGENative PAGE 分离碱性蛋白,要用
有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法:blue native(BN-PAGE),clear native(CN-PAGE),quantitative preparative native continuous(QPNC-PAGE)。在一个典型的native PAGE方法中,复合物被CN-PAGE或BN-PAGE分离。然后可以用其它分离方法如SDS-PAGE或等电聚焦做进一步分离。随后切割凝胶,蛋白复合物每一个部分都被分开。蛋白的每个条带可以消化后做肽链指纹图谱或重新测序。这样就可以提供一个
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