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- 原核表达载体构建实验
- 2025年07月12日
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原核表达载体构建实验
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中科迈晨（天津）科技有限公司
原核表达一般用于表达几乎所有无特殊修饰的蛋白质，可在不同的菌株中表达，同时尝试不同的诱导条件，包括：诱导时OD值、诱导温度、IPTG浓度、诱导时间。
操作步骤
1. 表达质粒的构建
2. 质粒转化及高表达菌株筛选
3. 转化菌摇瓶培养，诱导表达
4. 目标蛋白纯化
5. SDS-PAGE 检测表达及纯化情况
客户提供
提供已克隆在原核表达载体／克隆载体上的质粒或菌株；提供相关资料及核酸／蛋白序列，由我们利用生物信息学的方法进行分析处理后提出具体可行的实验方案。
我们提供
初步的培养条件和合理的纯化工艺；纯化后的蛋白；SDS-PAGE蛋白电泳结果和详细的实验记录；产品报告（含相关数据、SDS-PAGE及质粒测序结果等）。
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文献和实验细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用，近年来细胞学蓬勃发展，并取得了重大的进展，细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。 细胞实验谨慎复杂，需要的实验设备种类繁多，下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍： 一、CO2培养箱 CO2培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。 Thermo Scientific
这里说的稳转细胞系的构建是指慢病毒转染构建的稳转细胞系，可以构建表达细胞系，也能构建敲降细胞系，经常有人问我什么叫稳转和顺转的区别。瞬转细胞系，一般情况下能够稳定表达最多长一周左右，而稳转细胞系，只要构建成功就能稳定表达，没有时间限制，但是也不是肯定的，一般实验构建的细胞系超过 10 代以后，这个细胞系就有可能不靠谱了。接下来，咱们讲讲稳转细胞系的构建。一般来讲 shRNA 用的是 HIV 病毒，虽然已经经过处理，但是一听这名字也觉得渗人，无论如何保护自己是在实验室永葆青春的基础，所以一定
关键词： 副溶血性弧菌 直接溶血毒素基因原核表达载体 构建 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种能引起食物中毒和旅游者腹泻的嗜盐性细菌。直接溶血毒素(thermostable direct hemolysin,TDH)是其主要的致病因子。本研究通过构建tdh基因原核表达载体，并实现表达，以获得与天然抗原结构接近的重组抗原。 构建重组质粒tdh/Trc99A经酶切及PCR
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