万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃冻存
- 保质期:
二年
- 英文名:
BJ
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
1x10^6 cells
细胞英文(简称):BJ
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:皮肤
细胞形态:贴壁
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
传代方法:建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液,放置一个干净离心管内。(为稍后终止消化作准备。)
3、 用PBS清洗培养皿,弃去。
4、 向瓶内加入消化液(胰蛋白酶液)。以能覆盖培养瓶底为宜。(一般一个大皿1ml)
5、 2-5分钟后,轻轻震荡培养皿。使BJ人皮肤成纤维细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清(即原培养液)终止消化。
6、 收集细胞悬液,880转/分、5分钟离心,弃去上清液。
7、 加培养液至1ml,混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中,再加入相应体积的培养液。(90mm大皿是9ml,中皿好像是4mm,6孔板和小皿是2ml,96孔板是100ul)。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈,使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤:
1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许,用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察,计算计数板八大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算:
细胞数/ml=8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏:
BJ人皮肤成纤维细胞冻存和复苏的原则:慢冻快融
当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶很大,大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
1.冻存细胞
(1)选对数增生期细胞,在冻存前1d换液。
(2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×106/m1左右密度,离心,去上清。
(3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤
(4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m1悬液。
(5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,作好标记。
(6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40 min时间内,下降到液氮表面,再停30 min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。
标准程序:
当温度在-25℃以上时, 1~2℃/min
当温度达-25℃以下时, 5~10℃/min
当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中
简易程序:
将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40分钟内降至液氮表面,停30分钟后,直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
(1)从罐中取出冻存管。
(2)迅速放入37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成。
(3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
(4)BJ人皮肤成纤维细胞低速离心(880r/min) 5 min,去上清后再用培养液洗一次。
(5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分,密度应达到107/m1,在融后稀释20倍后,仍能保持5×105/m1数量。
| ECACC细胞库 | 86082105 | CMT64/61 | 89072705 | EB185 (JC) | 92020424 | MDA-MB-231 | 95051030 | MES-SA | 6092007 | H413 |
| ECACC细胞库 | 86082106 | CMT93/69 | 89081402 | U-87 MG | 92021401 | HT2 Clone A5E | 95051031 | MES-SA/Dx-5 | 6072611 | 833KE |
| ECACC细胞库 | 86082107 | 3.334 SC5/8 | 89081802 | 59M | 92022711 | U-2 OS | 95051033 | My-La CD8+ | 6101702 | KARPAS 422 |
| ECACC细胞库 | 86082802 | Detroit 551 | 89090402 | AGS | 92030501 | K1 | 95051229 | X1/5 | 6100302 | KARPAS 417 |
| ECACC细胞库 | 86082803 | BeWo | 89090404 | SIRC | 92030502 | RO82-W-1 | 95060212 | CCO | 7042701 | PNT2 (SERUM FREE) |
| ECACC细胞库 | 86090201 | HeLa229 | 89090405 | CCRF-SB | 92031915 | COR-L47 | 95060901 | IMT 9 | 7021401 | C22 (Clara) |
| ECACC细胞库 | 86090301 | CCD 16Lu | 89092101 | K-BALB (K-234) | 92031916 | COR-L51 | 95062823 | DMS 53 | 7021402 | T7 |
| ECACC细胞库 | 86093001 | BC3H1 | 89101301 | WI 26 VA4 | 92031917 | COR-L88 | 95062824 | DMS 79 | 93120817 | C1300 CLONE NA |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验美少女福音!Science 重磅报道,他们率先实现皮肤无疤痕愈合
「疤痕」,是成人伤口愈合的产物,也是万千仙女们痛恨的存在。 这种由过度纤维化导致的皮肤变化,在机制层面与肺部纤维化及心脏纤维化高度相似,如果我们能解决皮肤上的「疤痕」,就意味着我们也有了治疗心脏纤维化与肺部纤维化可能。 可正如肺纤维化与心脏纤维化无法治疗一样,无论市面的所谓的「祛疤」产品再怎么宣传,都无法真正解决成人皮肤受伤后的留疤问题。 学术界与工业界,也无时不刻不在探索治疗「疤痕」的办法。因为谁能解决疤痕问题,谁就能在美容市场中获得巨大的商业成功。 图片来源:Science 2021 年
培养细胞的 SASP 首先,研究人员使用基因毒性药物阿霉素 (doxo) 处理人原代皮肤成纤维细胞 (BJ),并以 1%(缺氧) 或 5%(常氧)的氧气浓度培养细胞。结果发现,在 doxo 处理后,缺氧和常氧状态下的细胞均丧失了增殖能力,表现为细胞增殖能力急剧下降的衰老表型;而缺氧和常氧的非衰老细胞则保持了相似的生长速度。 与此同时,doxo 处理的缺氧细胞出现了各种与衰老相关的特征,包括衰老相关的 β-半乳糖酶活性增强,持续的 DNA 损伤反应 (DDR),以及形态学的扩大。 图片来源:Molecular
肾细胞CCC-HPF-1 人胚肺二倍体细胞(自建)CCC-ESF-1 人胚胎皮肤成纤维细胞(自建)HFF 人前皮肤成纤维细胞HFSF 人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFTF 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞HK-2 人肾小球上皮细胞HKC 人胚肾上皮细胞HSF 人皮肤成纤维细胞MRC-5 人胚肺成纤维细胞WISH 人羊膜细胞CCC-HEL-1 人胚胎肝正常细胞(自建)CCC-HEK-1 人胚胎肾正常细胞(自建)CCC-HHM-2 人胚胎心肌组织来源细胞(自建)CCC-HPE-2 人胚
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









