- ¥800 - 2350
- DSMZ细胞
- 美国/德国/日本
- ACC--1091
- 2025年07月16日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃冻存
- 保质期：
二年
- 英文名：
Caki-1
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
1x10^6 cells
细胞英文(简称）:Caki-1
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:肾透明细胞癌皮肤转移
细胞形态:贴壁；上皮细胞样
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测:细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:McCoy's 5A +15% FBS；37℃，5% CO2
传代方法:建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液，放置一个干净离心管内。（为稍后终止消化作准备。）
3、 用PBS清洗培养皿，弃去。
4、 向瓶内加入消化液（胰蛋白酶液）。以能覆盖培养瓶底为宜。（一般一个大皿1ml）
5、 2-5分钟后，轻轻震荡培养皿。使Caki-1人肾透明细胞癌细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清（即原培养液）终止消化。
6、 收集细胞悬液，880转/分、5分钟离心，弃去上清液。
7、 加培养液至1ml，混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中，再加入相应体积的培养液。（90mm大皿是9ml，中皿好像是4mm，6孔板和小皿是2ml，96孔板是100ul）。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈，使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤：
1、将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许，用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察，计算计数板八大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml＝8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏：
Caki-1人肾透明细胞癌细胞冻存和复苏的原则：慢冻快融
当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶很大，大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。
1．冻存细胞
（1）选对数增生期细胞，在冻存前1d换液。
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×106／m1左右密度，离心，去上清。
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m1悬液。
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，作好标记。
（6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度,在30～40 min时间内,下降到液氮表面，再停30 min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。
标准程序：
当温度在-25℃以上时， 1～2℃/min
当温度达-25℃以下时， 5～10℃/min
当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中
简易程序：
将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1～2℃的速度，在40分钟内降至液氮表面，停30分钟后，直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
（1）从罐中取出冻存管。
（2）迅速放入37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。
（3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
（4）Caki-1人肾透明细胞癌细胞低速离心(880r／min) 5 min，去上清后再用培养液洗一次。
（5）用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分，密度应达到107／m1，在融后稀释20倍后，仍能保持5×105／m1数量。
| DSMZ细胞库 | ACC 148 | NEURO-2A | ACC 277 | DK-MG | ACC 537 | ME-1 | ACC 47 | DOHH-2 | ACC 101 | N4TG3 |
| DSMZ细胞库 | ACC 441 | MS-5 | ACC 315 | HT-1080 | ACC 265 | LXF-289 | ACC 387 | KYSE-450 | ACC 281 | 2A1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 178 | 2E10-H2 | ACC 280 | PAB-1620 | ACC 521 | TALL-1 | ACC 220 | KASUMI-1 | ACC 89 | 72A1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 629 | DOGKIT | ACC 201 | 23132/87 | ACC 46 | KE-37 | ACC 366 | SD-1 | ACC 429 | VLM |
| DSMZ细胞库 | ACC 42 | 697 | ACC 547 | SKM-1 | ACC 365 | CAL-54 | ACC 141 | SK-HEP-1 | ACC 174 | MDBK |
| DSMZ细胞库 | ACC 621 | CL-38 | ACC 532 | JURL-MK1 | ACC 516 | TC-71 | ACC 374 | KYSE-510 | ACC 171 | BC3H1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 2 | L-929 | ACC 286 | TI-4 | ACC 186 | SPC-BM-36 | ACC 381 | KYSE-410 | ACC 356 | SU-DHL-1 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验三句话读懂一篇 CNS：喝酒为何拉近社交距离；教科书级成果，RNA 糖基化修饰...
梅雨季节，听着外面淋淋沥沥的雨声，静静地了解最新学术进展，也是一件舒心的事。 1. Cell：鉴定出肾癌复发新的潜在标志物 肾透明细胞癌是免疫原性肿瘤，复发率为 40%。2021 年 5 月 20 日，来自美国哥伦比亚大学的 Charles G. Drake 教授团队在 Cell 杂志上发表了研究论文 Single-cell protein activity analysis identifies recurrence-associated renal tumor macrophages
肾透明细胞癌 癌细胞呈多角形或立方形，轮廓清楚，胞浆透明，核居中，深染。癌细胞排列成片状，间质很少 ×230 图12-28 肾透明细胞腺癌 癌细胞大，胞浆透明，排列成腺样结构，间质少 ×275 转移 肾细胞癌除直接蔓延向邻近组织扩散外，可通过血道和淋巴道转移。癌组织血管丰富，早期即可发生血路转移。有时原发灶体积很小，无局部症状，但已侵入肾静脉引起远处转移。最常转移到肺，其次为骨、局部淋巴结、肝、肾上腺和脑。有些肾细胞癌可转移至对侧肾。有些可转移
。癌组织的间质很少，但血管丰富，有些区域纤维组织可增多，常有出血、坏死和钙化。 图12-27 肾透明细胞癌 癌细胞呈多角形或立方形，轮廓清楚，胞浆透明，核居中，深染。癌细胞排列成片状，间质很少 ×230 图12-28 肾透明细胞腺癌 癌细胞大，胞浆透明，排列成腺样结构，间质少 ×275 转移 肾细胞癌除直接蔓延向邻近组织扩散外，可通过血道和淋巴道转移。癌组织血管
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
