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赫澎(上海)生物
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文献和实验,在凋亡的过程中从线粒体内释放进入细胞核,导致染色质沉着和大量的DNA片段化。AIF所诱导的凋亡似乎与caspase通路没有直接联系,因为广谱的caspase阻断剂并不能抑制AIF诱导的凋亡。过表达Bcl―2可以使线粒体表面的渗透性穿透孔处于关闭状态,抑制AIF的释放,但不能阻断AIF诱导的凋亡。由此可见,AIF是凋亡的执行因子之一,但其引起染色质沉着和DNA片段化的机制尚未阐明。另外,线粒体通透性的变化还会造成电子传输链的失调和膜电位丢失,使线粒体功能丧失,ATP产生障碍,此时促发的凋亡
1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、RNA引物和四种dNTP的情况下,通过高温变性(90℃-95℃,1-2min),低温退火(25℃-37℃,1-2min),中温延伸(60℃-75℃,90sec-5min),这样反复循环的过程中,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1)、PCR反应成分: TaqDNA聚合酶引物浓度:一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50-200μ
DNA甲基化结构基因、DNA甲基转移酶以及DNA去甲基化等知识概述
检测以发现新的甲基化位点;3.方法快速、简便。缺点是:1.一些DNA片段的特殊构型也可与MBD柱相结合,造成MBD非特异性捕获而引起假阳性(如:EcoRⅡ可与MBD结合);2.是一种定性而非定量的方法;3. 由于MBD柱中所含多肽的量不完全相同,因此,使用不同的MBD柱或单个柱经多次使用得到的分离产物之间会存在差异。 3 )联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD(Combination of methylated-DNA precipitation and methylation
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