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- 中国大陆
- KL-D4022
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
共100ml
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒
规格：共100ml英文名：DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP)，用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。
DAB，即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶的催化下，DAB会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB显色后，还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可以用于Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
用于免疫组化或原位杂交时，如果每个片子使用0.2毫升显色液，那么本试剂盒共可以检测100个片子。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。DAB显色液A和DAB显色液B均需避光保存。
注意事项：
DAB对人体有害，请注意适当防护。
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文献和实验性笔在组织周围画圈，然后滴加稀释好的一抗，如果做阴性对照实验，就在对照组的组织上滴加 PBS。加完一抗后于 4 °C湿盒中孵育过夜。（抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定，时间控制在 15h 以上）。 PBS 冲洗切片 3 次，每次 3 min，吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗 ，37 ℃ 孵育 30 min。 信号检测 PBS 冲洗切片 4 次，每次 3 min，甩去 PBS 液体后吸水纸擦干切片，每张切片滴加新鲜配制的 DAB 显色液，显微镜下观察，阳性信号为棕黄色或棕褐色，时间
底物范围较广，包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB，0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3％ (W
或细胞中目的抗原表达水平低：可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 （3）试剂超过有效使用期：及时更换试剂。 （4）操作中，滴加试剂时缓冲液未沥干，致使试剂稀释：可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥）。 （5） 蛋白封闭过度：封闭时间不要超过 2h。 Q3：为什么出现高背景染色，怎么办？ （1）一抗浓度过高：对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 （2）显色过度：缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 （3）洗涤不充分：适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 （4）封闭
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