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文献和实验Western blot中硝酸纤维膜和PVDF膜的选择及其特点
使用。 PVDF转移膜:PVDF是一种高强度、耐腐蚀的物质,通常是用来制造水管的。 PVDF膜可以结合蛋白质,而且可以分离小片段的蛋白质,最初是将它用于蛋白质的序列测定,因为硝酸纤维素膜在Edman试剂中会降解,所以就寻找了 PDVF作为替代品,虽然PDVF膜结合蛋白的效率没有硝酸纤维素膜高,但由于它的稳定、耐腐蚀使它成为蛋白测序理想的用品,一直沿用至今。PVDF膜与 硝酸纤维素膜一样,可以进行各种染色和化学发光检测,也有很广的适用范围。这种PVDF膜,灵敏度、分辨率和蛋白亲和力在精细工艺下比常规
,所以要增加WB的灵敏度和分辨率,提高所使用膜的纯度是个可以考虑的选择。如果NC膜搀杂一些醋化纤维素--这在前面已经提到,会影响蛋白质结合。Protran由于是纯NC膜,比较脆,机械耐受力欠佳,需要小心操作,如果担心自己“粗手粗脚”,那么就可以考虑一下Optitran或者Pall公司的以耐受力著称的BioTrace NT Nitrocellulose Transfer Membrane。卷膜肯定是最实惠的选择,只不过要自己动手裁剪--切记,必须带手套操作。 2. PVDF膜 与硝酸纤维素膜相比
,使血浆成分移动到多种二级低蛋白质键结固体载体上,然后再进行PCR扩增。结果显示,HEMASEP V介质可用于制备细胞外病毒DNA来进行扩增,而无须采用离心方法(见图3)。图3 与HEMASEP V介质接触的诊断介质直接进行PCR扩增1:25的稀释溶液加入40ml新鲜人血,滴到HEMASEP V介质上。血浆带上3cm长的介质直接进行PCR扩增(d), 或者一种诊断膜与HEMASEP V接触来收集血浆。二级介质包括 Premium Release膜(e)、LoProsorb介质(f)和LoProdyne
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