带有Emflon® II膜的Acro® 50通气滤器（50m

这些蛋白质互作实验方法，你都了解吗？

其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11：使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子，而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行，在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白，从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白，然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析，从而确认互作

膜蛋白整体解决方案

重重。 图 1. 利用QIAgenes优化序列，昆虫细胞体外进行膜蛋白表达。 利用 EasyXpress Insect Kit II，crude lysates （T）， supernatant （S）， and pellet fraction （P） by SDS-PAGE and western blotting using Penta·His antibodies. Note that microsomes with integrated membrane

Omega质粒DNA中量提取流程

的E.coli 接种于30-50ml LB/抗生素培养液中，37°C搖床培养12~16 h； 2. 取30-50ml的菌液，室温下3，500-5，000xg离心10min收集细菌。 3. 倒弃培养基。加入2.5ml Solution I/RNaseA混和液，漩涡振荡使细胞完全悬浮。 4. 往重悬混和液中加入2.5ml Solution Ii，轻轻颠倒混匀7-10次后可将混合液室温放置2min以提高产量。避免剧烈混和裂解液且裂解反应不要超过5 min。