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上海研谨生物科技有限公司
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文献和实验500µl。 案例分析 外膜蛋白 A(Outer membrane protein A, OmpA)是革兰氏阴性菌外膜蛋白质的主要组分,也是一个关键的毒性因子,且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 OmpA 亚单位的流程。 首先使用合适的去垢剂 C8E4,把 OmpA 膜蛋白溶解出来; 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 ml 进行初步纯化,收集目标
,使血浆成分移动到多种二级低蛋白质键结固体载体上,然后再进行PCR扩增。结果显示,HEMASEP V介质可用于制备细胞外病毒DNA来进行扩增,而无须采用离心方法(见图3)。图3 与HEMASEP V介质接触的诊断介质直接进行PCR扩增1:25的稀释溶液加入40ml新鲜人血,滴到HEMASEP V介质上。血浆带上3cm长的介质直接进行PCR扩增(d), 或者一种诊断膜与HEMASEP V接触来收集血浆。二级介质包括 Premium Release膜(e)、LoProsorb介质(f)和LoProdyne
(5)抽取每个孔中的1×洗液I,每孔加入2 ml的1×洗液II清洗2次,每次5 min,室温摇床震荡,每次清洗要抽干净洗液,用去离子水稀释20×洗液II。 (6 ) 配制生物素标记抗体,快速离心生物素标记抗体的小管,加入100 µl的1×封闭液,混合均匀,再将管中所有的溶液加入到2 ml的1×封闭液中。 (7) 每个芯片上加入1 ml稀释好的生物素标记抗体,盖上盖子,包上塑料薄膜,室温振荡孵育1-2小时。 (8 )清洗, 同3和4。 (9 ) 每张膜加入2 ml的1000倍稀释的HRP
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