微孔滤板，0.45µm AcroPrep 96孔过滤板，

细胞培养基本技术

； MTT法简单快速、准确，广泛应用于新药筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性实验等。 操作步骤： （1）单细胞悬液接种于96孔培养板；103-104细胞/孔，每孔培养基总量200微升（96孔培养板每孔容积370微升），37℃、5％CO2培养箱中培养一段时间（根据实验目的决定培养时间）； （2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微升／孔）；继续培养3小时； （3）吸出孔内培养液后，加入DMSO液（150微升／孔），将培养板置于微孔板扳荡器上振荡10分钟，使结晶物溶解； （4）酶标仪检测各孔OD值

常规细胞培养方法

mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。 1mol/L HEPE缓冲液配制方法如下： 准确称取HEPTS 238.3g，加入新鲜三蒸水定容至1L。0.22um微孔滤膜过滤除菌，分装后4℃保存。 注意：因为现在市售HEPES为约10g包装的小瓶，所以可根据实际情况灵活配制，但是要保证培养液内HEPES的终浓度仍然为20m mol/L 。如：称取4.766克HEPES溶于20ml三蒸水中，过滤除菌后可完全（20ml）加入1L培养液中，或者每100ml培养液中加入2ml即可。 9.谷氨

各类细胞培养小结

有限。 4. 消化细胞时间不要过长。 大鼠皮层神经元原代培养 液体配制： 硼酸硼砂缓冲液：0.05M四硼化钠45ml，0.2M硼酸55ml，pH8.4； 胰酶－EDTA消化液：胰酶－0.125g；EDTA－0.2g；D-Hanks平衡盐液定容至100ml 所用的培养板、培养瓶或玻片预先经100μg/L多聚赖氨酸硼酸盐缓冲液于37℃包被4h，三蒸水洗三遍晾干备用。 操作步骤如下： 1. 孕16d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75％乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下