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名称:25988-63-0型多聚L-赖氨酸(分子量15万~30万)说明书
产地:国产|进口
CAS:25988-63-0
规格:25mg
英文名:Poly-L-lysine, Mw 150,000-300,000
品牌:百奥莱博
本品为多聚-L-赖氨酸(Poly-L-lysine),分子量为150,000-300,000,适用于细胞培养。另外,以氢溴酸(HBr)的形式提供,约1个赖氨酸残基结合1分子的氢溴酸,使其以稳定的结晶固体形式提供,并具有更强的水溶性。用作细胞培养基质,推荐使用量为:对于25cm2的培养板需要0.1mg/ml的聚赖氨酸溶液约0.5ml-1.0ml。
多聚赖氨酸(poly-lysine)是一种带正电荷的氨基酸聚合物,能够结合于DNA,红细胞膜或任何带负电荷蛋白,是一种非特异性的细胞粘附因子,促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面(如细胞培养皿,载玻片等)的静电相互作用。当吸附到培养表面后,多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关,即分子量较低,粘度较低;分子量较高,粘度较高,提供的粘附位点也较多。分子量>30,000的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。
多聚赖氨酸(poly-lysine)有两种常见亚型,D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子,因此两种亚型都可用作包被固体基质,在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。
中文别名:多聚赖氨酸溶液(L型)
英文别名:Poly-L-lysine Solution; PLL; Poly-L-lysine hydrobromide Solution
CAS:25988-63-0
分子式:L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys·xHBr
分子量:150,000-300,000
外观:白色至类白色粉末
溶解性:溶于水(50mg/ml)
储存条件:-20℃干燥,有效期4年
结构式
注意事项
1)注意在细胞培养相关应用中,某些细胞会消化多聚 L-赖氨酸并吸收,摄入过多的多聚 L-赖氨酸会产生一定的细胞毒性。因此,遇到这种情况需选用多聚 D-赖氨酸(Poly-D-lysine),如多聚D-赖氨酸(5 mg/ml),分子量:150,000-300,000,细胞培养级,货号:SY0464。
2)将若想去除本品中的HBr,可将本品溶于中性缓冲液,可透析除去盐离子。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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25988-63-0型多聚L-赖氨酸(分子量15万~30万)说明书关键词:25988-63-0,多聚赖氨酸溶液(L型),分子量15万~30万,多聚L-赖氨酸
·细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)
编号:SY0471
英文名称:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
规格:20 rxn
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
储存条件:4℃,有效期一年。
25988-63-0型多聚L-赖氨酸(分子量15万~30万)说明书关键词:25988-63-0,多聚赖氨酸溶液(L型),分子量15万~30万,多聚L-赖氨酸
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