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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Agarose gel DNA Recovery Kit
- 库存:
506
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次|100次|200次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售凝胶DNA提取试剂盒厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:凝胶DNA提取试剂盒厂家价格
品牌:百奥莱博
编号:ALH096
规格:50次|100次|200次
英文名:Agarose gel DNA Recovery Kit
本试剂盒适用于琼脂糖凝胶DNA的纯化回收。在高离序盐存在的情况下,DNA*(代"片")断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
平衡液——————————10ml
溶胶液DD—————————50ml×2
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化*(代"钠")和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
5.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA*(代"片")段一般在100bp到40kb之间,过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA*(代"片")断大小有关。一般1-15μg,100bp-5kb的DNA*(代"片")段,回收率可高达85%。
5. 切胶回收时,紫外灯观察对DNA*(代"片")段有损坏作用,应该尽可能使用能量低的长波紫外线,并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,DNA*(代"片")段应该保存在-20℃。DNA*(代"片")段如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒|DNA凝胶回收试剂盒|凝胶DNA提取试剂盒|凝胶DNA纯化试剂盒
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·RNA保存液(长期保存RNA)
编号:ALH062
英文名称:RNA long-term preservation solution
规格:2ml
本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。
用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:
1. 对固体RNA 沉淀,每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。
从RNA长期保存液中沉淀RNA:
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
0.25μg/μl,可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀,然后再加入4 倍体积乙醇。
2. 室温放置5 分钟。
3. 12000rpm,5 min。弃上清。风干,溶解。
4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。
直接使用RNA长期保存液中的RNA:
直接吸取RNA长期保存液中的RNA,进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附:甲醛变性电泳样品准备: 临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl), 50%甘油/含0.25 mg/ml 溴芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合,55℃温育10 分钟,按照标准的甲醛变性电泳过程上样。
注意事项:
1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性,做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。
储存条件:4℃
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文献和实验滤纸上,正面朝上,再用浸泡后的 PVDF 膜盖在胶的正面,赶出气泡。错误演示:菜鸟师姐手握短板,揭开长板,背面朝上,正面朝下……结局:蛋白全部跑出,结果一片空白。从 3 月份到 11 月份,曝光结果完全一致:空白,无任何条带。菜鸟师姐和淑女师妹曾一度怀疑:1.操作问题:但菜鸟师姐在经历 N 次失败后,替师兄做了一次 Western,结果超乎想象的完美,所以操作问题排除。2.抗体问题:菜鸟师姐的一抗全是 CST 进口,但仍执意将将样本发到厂家,厂家用我返回的抗体和样本做出了条带;二抗国产,换了两次二抗
,约每克湿菌加3 mlTE 缓冲液。② 按超声处理仪厂家提供的功能参数进行破菌;10 000g 离心,15min ,分别收集上清液和沉淀。③ 分别取少量上清和沉淀,加入等体积的2× 凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS -PAGE 。注意事项:超声破碎与声频、声能、处理时间、细胞浓度、菌种类型等因素有关,应根据具体情况掌握;超声波破菌前,标本经3 -4 次冻溶后更容易破碎。2 )包涵体的分离蛋白质在细菌中的高水平表达,常形成相差显微镜下可见到的细胞质颗粒,即为包涵体,经离心沉淀后可用Triton
的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。 Goldview从相似性对比试验结果来看
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