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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验及位点特异性突变反应的效率。c 通过反相HPLC.纯化的引物纯度通常可以超过95%。纯化的原理与柱纯化的相同。HPLC可以用于纯化大量(如大于1µmol)的引物,但是不适用于大于50个碱基的引物。d PAGE纯化是终极的纯化方法。使用这种方法纯化的引物纯度一般可以达到99%,由于聚丙烯酞胺凝胶可以区分无论是长度还是序列的单一碱基差异的分子,长度在50-100个碱基之间的引物均可以使用这种方法进行纯化。因为要从凝胶中回收引物,所以Page纯化得到的引物量比较少.e 凝胶过滤的方法,由于去除了合成
具有颜色的荧光染料代替同位素标记。4种双脱氧核苷酸终止子被标记上不同颜色的荧光基团。另外,与最初的Sanger法不同,荧光基是标记在终止子上,而不是在引物上。这种不同颜色标记的方案可以实现一个反应管中同时进行4个末端终止反应。采用聚丙烯酰胺凝胶分离,并通过计算机荧光检测系统分析梯状反应产物。这些改进极大地提高了测序速度,减少了测序过程中的人为干扰。次年,利用LeroyHood实验室的技术,ABI推出了第一款半自动DNA测序仪ABI370。在随后的20年中,测序仪的性能得到了极大的提升。但基本工作
血清。 2) 配制PBS + 5%FBS:9.5ml 0.9x PBS + 0.5ml FBS胎牛血清。 3) 把胚胎放置在一个5ml 的聚苯乙烯流式细胞管内(每次分析50个胚胎)。尽可能多吸收液体,并添加1ml PBS / FB。 4) 用最大速度1 / 4的速度混匀胚胎。请检查没有胚胎/细胞团块。 5) 标记每个胚胎的1X 50ml 管。将40μm的细胞
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