UNO S精纯PEEK层析柱

膜蛋白纯化攻略分享

组分，也是一个关键的毒性因子，且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位的流程。 图 2. 大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 0mpA 亚单位流程图   首先使用合适的去垢剂 C8E4，把 OmpA 膜蛋白溶解出来； 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 mL进行初步纯化，收集目标蛋白洗脱液； 浓缩后上样进行最后一步分子筛精纯，使用高分辨率层析柱 Superdex 200

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

你是不是每次做纯化实验心里都会默念：退！退！退！ 有关纯化实验的所有问题都退！感觉像是在作法而不像是在做实验。 虽然蛋白纯化被认为是考验基本功的实验，但接踵而至的考验只会让原本不熟练的实验雪上加霜，导致纯化实验失败了一次又一次…… 失败原因五花八门，比如：标签蛋白纯不出来，过了分子筛跑 SDS 胶还一堆杂带？面对着样品的精细分离，却不会选层析柱？纯化得到的组分中没有或只有少量目的 His 标签蛋白，知道了蛋白等电点却不知如何选

离子交换层析

填料 离子交换层析填料主要有基架和配基两部分组成，其中基架的类型和粒径大小决定了填料的耐压、流速、分辨率等，粒径越小，填料的分辨率越高，而同等高度的层析柱带来的反压也相对较大，而配基是实际和样品中生物分子结合的基团。 离子交换填料的配基根据离子交换层析类型的不同分为阴离子交换配基及阳离子交换配基，常见的离子交换填料配基类型 （如表6)，在离子交换填料选择时，优先考虑强离子交换配基，如阴离子配基Q、阳离子配基S等，如果强离子交换配基无法得到满意的结果，也可以考虑使用弱离子交换配基为层析带来不同的选择